少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因突变分析及其真核表达载体的构建.pdf

华西口腔医学杂志第”卷第6期2009年12月 ·6lo· No．6 westclIim V01．27 J0呻1aI“stomatology9箜2009 【文章编号】1000—1182(20帕)伽—％lO-014 盎爿代分析 少汗型外胚层发育不良症eda—A1基因7弋又 及其真核表达载体的构建 雷科1车团结2’3王锦明3邓旎1张琳1何祥一1 (1．兰州大学口腔医院 口腔修复科；2．兰州大学生命科学院细胞生物学研究所； 3．兰州百源基因技术有限公司，甘肃兰州730000) 【摘要】 目的 法设计含有曰口mH I和日i，ldⅢ的酶切位点的引物，从HED患者和正常人外周血淋巴细胞中提取总mRNA，利用RT— PCR法克隆eda—Al(M，w)基因cDNA序列；并运用日硼H A—+c错义突变，导致306位编码氨摹酸由谷氨酰胺变异为脯氨酸；经PCR法、重组载体双酶切法、DNA测序验证， 实验基础。 【关键词】 少汗型外胚层发育不良症；eda—A1基因；突变； 真核表达载体 【中图分类号】 R781．6 【文献标志码】 A 【doi】 lO．3969，j．is8n．1000—1182．2009．06．008 ofthe Mu纽Hon eda—A1 of雌∞mbined a眦lysis ge骶forhypollidr0墩ectode硼aldy叩I嬲ia锄d∞啦tr眦60n vector eIII【aryodc既pre鹪ion三日托j伽E儿彻j诂二j肼^『G_h—m托矿觥Mjz舢^，G三抚j船J勋学历! (1．Depf．旷丹∞^bdD眦记s，Sc幻oZo，S胁删肋如肼￡帆=如M‰妇e瑙i够￡n磁幻u730000，吼in弼2．胁m姚旷cefj B幻幻肼＆^oDl旷L澹scj【e∽巳￡锄。^oHUh西e您锄L鲫=^DM 730000，劬i船) Co唧唧；L纰切M The 0fthis w鹊toclone肌d intheeda—A1 for 【Abstract】objectivepurpose study arlalyze舢tation gene ec州emal toconstnlctanewrecombined vector(IIlutant hypohidmtic dysplasia(HED)，and eukaryoticexpression M， 埘ldW)船ab鹊isf打furtheronthe functi∞．Me恤优bAftertotalmRNAw∞ext瑚Ictedf如m study genetic pe— the rever眈tran— HEDa雎ct c∞trol，eda—A1 riphe脚bloodlymphoc”船f如m patient明d genew嬲锄plifiedby chainreactioll(RT—PCR)witha of the sites