8-羟基脱氧鸟苷检测方法研究进展.pdf

JournalofHealthLaboratoryTechnology，Oct2007；Voll7N010 1915 中国卫生检验杂志2007年lo月第17卷第10期Chinese 【综述】 8一羟基脱氧鸟苷检测方法研究进展 汪莉君，邵华+ (山东省职业卫生与职业病防治研究院，济南2s0062) [关键词]8一羟基脱氧鸟苷；检测；进展 [中圄分类号]R446 [文献标识码]A [文章编号】1004—8685(2007)10—191．5—02 8一羟基脱氧鸟苷(8一Hydroxy一2’一d鲫【y弘＆ni眦，8一如果实验废液处理不当，就会造成环境污染，且”P元素会对 实验人员本身形成放射性损害。 OHdG)是活性氧自由基(ROS)引起DNA氧化损伤修饰产物 之一，其生成原因很多，主要是电离辐射、化学致癌物代谢活 化及细胞正常新陈代谢过程产生大量ROS直接攻击DNA中2高效液相色谱一电化学(HPLC—ECD)法 的鸟嘌呤(dG)，使脱氧鸟苷氧化为8一OHdG。8一OHdG可被 机体特异性DNA修复酶剪切清除并经肾脏随尿排泄，其台量 ECD测定，具有较高灵敏度，其最低检测限约为20fmol／lunol 反映机体氧化损伤程度，既是个体接触标志物，又是效应标志 核苷．需样品量小，无损伤性，速度快，选择性好，对组织细胞 物…。它一旦逃避了机体自身修复．就可能成为致突变、致 畸、致癌的启动因子”】。8一OHdG在体内稳定存在，为代谢终的方法。袭著革等”1应用此技术研究标准石英粉尘和青石棉 产物，且只能通过DNA氧化损伤途径形成，并可通过分析其在 组织细胞核DNA及线粒体DNA中的含量来反映体内DNA氧机制，结果表明石英粉尘和青石棉均可致DNA分子氧化损伤 化损伤．体液中8一OHdG水平不受饮食等因素影响，不是细 胞更新结果，是目前国际上公认的一种新型评价DNA氧化损 伤和氧化应激状态的敏感指标和生物标志物。因此测定机体 8一OHdG古量对评估体内氧化损伤和修复程度．氧化应激与断裂程度与其浓度有依赖关系。逢兵等”1应用此技术对52 DNA损伤相互关系，研究退行性疾病、衰老机制、痛发牛机制、 环境毒物、慢性炎症疾病与氧化应激的关系等均有重要的意 义，也可以用来评价抗氧化剂治疗DNA氧化损伤的效果。目 量下降与精子DNA损伤存在一定联系。毕胜等”。用此方法 前，国内外主要检测各种组织DNA以及尿液中的8一OHdG， 用来阐明某些疾病的发病机制和探索新治疗方法，并取得了 很好的进展。现就当前的检测方法进行简单介绍和评述。 在DNA修复机制缺陷而易发生氧化损伤。但由于仪器价格较 高，此法并未推广应用于常规检验。 1“P后标记法 。 ”P后标记法由Randerath和Gupta等人于1981—1982年 3气相色谱／质谱(C．CyMS) 首先建立．目前已成为灵敏度最高、应用最广泛的DNA加合物 GC／MS法是将气相色谱仪与质谱仪联合使用的一种方 检测方法。其原理是DNA链首先降解为3’单核苷酸，然后去 法．可为DNA损伤中氧化产物的鉴定提供可靠而明确的数据， 磷酸化，而具有加合物的3’单磷酸核苷可以抵抗去磷酸化作 其检测下限为1／50核苷”“。梅索容等““利用此法测定尿中 用，从而在特异T4多核苷酸激酶作用下，[1—8P]ATP的磷 酸根基团转移到具有加合物的单磷酸核苷的5味端，形成3’ 于正常人。袭著革等”“用此法定量检测10种多环芳烃 一5’二磷酸核苷，通过检测[1一丑P]ATP的量对加台物进行定 量。潘洪志等”o用此法测定镉中毒大鼠肝脏中8一OHdG含以及环境烟草烟雾的主、侧流烟雾颗粒物中，其标准混合物可 量，证明镉中毒可导致大鼠脂质过氧化和DNA氧化损伤。用 该方法，潘洪志等”1还测定出正常小鼠各组织中8一OHdG含 谱仪价格昂贵，一般实验室难以应用。