临床检验学基础第讲授课教师熊立凡幻灯片.ppt

羊水检验 羊水检验概念 l?? 适应证高危妊娠有流产、早产、死胎史者疑胎儿遗传性疾病者亲代有代谢性缺陷病者曾分娩过染色体异常婴儿者高龄孕妇确定性连锁遗传病携带者胎儿性别者疑母儿血型不合者妊娠早期受大剂量电离辐射者曾患严重病毒感染性疾病者检查宫内胎儿有无感染者 l??标本采集和理学检验标本采集羊水标本由妇产科医师采集 羊水化学检查水分98%～99%有机物和无机盐：1%～2%有形成分：少量白细胞、胎儿上皮细胞 表 化学检查项目 胎儿成熟度检验目的：决定选择高危妊娠有利分娩时机；降低新生儿死亡率方法：监测羊水成份变化，评价相关器官功能状况 胎儿肺成熟度检查羊水泡沫试验（foam stability test或shake test） 薄层色谱法卵磷脂（lecithin，L）与鞘磷脂（sphingomyelin，S）比值测定（L/S） 磷脂酰甘油测定（phosphatidyl glycerol，PG） 羊水吸光度测定 荧光偏振微粘度测量法（microviscosity test by fluorescence depolarization method） 新生儿特发性呼吸窘迫综合征（idiopathic respiratory distress syndrome，IRDS）肺泡表面活性物质卵磷脂缺乏，是新生儿严重疾病之一。主要见于37周前早产儿、剖宫产儿、糖尿病产妇或妊娠高血压综合征的初生儿 胎儿肾发育成熟检测项目 胎儿肝成熟度检测项目 胎儿皮肤成熟度检查 胎儿唾液腺成熟度检查 先天性遗传性疾病产前诊断产前诊断（prenatal diagnosis）＝出生前诊断（antenatal diagnosis）＝宫内诊断(intrauterine diagnosis) 检查目的判断胎儿有无先天性遗传性疾病，以确定是否进行选择性流产检查方法影像学、生物化学、细胞遗传学、分子生物学等技术 产前诊断疾病种类：染色体病 产前诊断疾病种类：染色体病 染色体核型分析是产前诊断染色体病主要方法染色体细胞制备培养时间：胎儿羊水细胞9～12d绒毛细胞7～14d胎儿血细胞24～48原位杂交技术或引物原位DNA合成技术，1h可获染色体核型分析准确结果 先天性遗传性疾病产前诊断性连锁遗传病(sex-linked inheritance disease)：多为X连锁隐性遗传病，临床常见有血友病甲、血友病乙、G-6-PD缺乏症等。如：父亲为X连锁隐性基因携带者，母亲为正常，则男性胎儿正常，女性胎儿全为X连锁隐性基因携带者如：母亲为X连锁隐性基因携带者，父亲为正常，则男性正常胎儿和患儿各占50%，女性正常胎儿和基因携带者各50% X染色质检查（examination of X chromatin，Barr test） Y染色质检查（examination of Y chromatin） 性别基因诊断 目的：羊水细胞性别检查复杂，干扰因素多。基因诊断可提高正确性、可靠性。性别基因诊断最常用方法 神经管缺陷产前诊断1．甲胎蛋白(AFP)测定：神经管缺陷产前诊断最常用方法 2．羊水胆碱酯酶测定 粘多糖沉积病产前诊断 胰腺纤维囊性变产前诊断 羊水细胞内酶分析先天性代谢缺陷病：系因基因突变导致某种酶的缺失多数先天性代谢缺陷病：尚无有效的治疗方法（除苯丙酮尿症、肝豆状核变性等可通过控制饮食和药物治疗外） 分子生物学技术在产前诊断中应用DNA探针技术：单股DNA小片段以放射性同位素、酶、荧光素或化学发光物标记后，同被检DNA中的同源互补系列杂交，从而检出所要查明的DNA（基因）。 常用检测基因方法 目前认为，SRY是睾丸决定因子的最佳候选基因 聚合酶链反应(PCR) Y染色体特异的SRY基因区域（sexdeterminating region of Y chromosome） Y特异DNA探针 胎儿脑积水、先天肾脏病及糖尿病，先兆子痫等所致胎盘功能不足、流产、死胎等 其他AFP增高疾病 诊断开放性神经管缺陷，准确率90%以上 母血筛查 胎儿血AFP是羊水AFP的150～200倍。 患儿：可使羊水中AFP含量高于正常妊娠羊水中10倍以上。 无脑儿、脊柱裂等开放性神经管缺陷胎儿 16～20周羊水中达40mg/L 20～22周逐步下降 32周后降至25mg/L至妊娠足月 正常妊娠 AFP主要在胎儿肝脏和卵黄囊合成，部份来自胎儿胃肠道、羊膜及绒毛膜细胞，随胎儿尿液排入羊水 来源 其他：严重先天畸形、流产、胎儿脐疝等 有助于确诊胎儿开放性神经管畸形。 活性增高 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。 筛诊阳性率可达到99.5% 检测方法 羊水真性胆碱酯酶测定(act