7个桉树杂交亲本RAPD位点多态性和杂合性的研究_英文_.pdf

第 39 卷 第 2 期 林 业 科 学 Vol39 , No2 2 0 0 3 年 3 月 SCIENTIA SILVAE SINICAE Mar . , 2 0 0 3 7 个桉树杂交亲本 RAPD 位点多态性 和杂合性的研究 1) 3) 4) 5) 2) 甘四明 　白嘉雨 　吴坤明 　吴菊英 施季森 　 ( 中国林业科学研究院热带林业研究所 　广州 510520) (南京林业大学林木遗传与基因工程实验室 　南京 210037) 摘 　要 : 　利用 RAPD 分子标记技术对桉树杂交亲本的 RAPD 位点多态性和杂合性进行了比较研究 。研究材 料包括不同起源的3 个尾叶桉母本和 4 个细叶桉父本及其杂交产生的 5 个全同胞家系 ,每家系 10 株子代 。 RAPD 为显性标记 ,其检测一个杂交群体中分离位点的概率可以用分离位点至少在一个个体中出现的概率来 ( ) n - 1 ( ) ( ) n - 1 ( ) ( ) 表示 ,即 1 - 12 A a ×aa 或 aa ×A a 或 1 - 34 A a ×A a n 为群体内个体数 ,则利用 10 个个体的 杂交群体 ,其概率分别为 998 %和 925 % ,检测的有效性较高 。各样品 RAPD 扩增结果统计中 , 以 1 代表一条 谱带出现 , 以0 代表不出现 。9 个随机引物共扩增出58 条谱带 ,亲本间呈多态性的谱带 42 条 , 占724 % ,多态 性较高 。利用亲本的 RAPD 数据矩阵 ,计算了亲本间的遗传距离 。根据亲本出现的谱带在子代中是否分离判 断该位点是否为杂合位点 ,如果某谱带出现于亲本且在子代中分离 ,则亲本在该位点上的基因型为 A a , 即杂 合位点 ,从而统计出不同亲本的杂合位点数 。以亲本的杂合位点数 占其总位点数的百分比表示亲本的杂合 性 ,检测各亲本的杂合性水平 。7 个亲本的杂合性平均为 280 % ,杂合性较高 。但不同亲本的杂合性有差异 , 介于 162 %和 395 %之间。并且 , 同一无性系在不同的家系中检测到的杂合位点数和计算的杂合性有差异 , 这主要是由于以下两个原因;一是 RAPD 为显性标记技术 ,不能有效探测样品本身的杂合位点 , 因此当另一亲 本在该位点上基因型为 AA 时 ,则亲本的基因型即使为 A a ,子代在该位点上的 RAPD 谱带也没有分离 ;二是 10 ( ) 个个体的群体偏小 ,有些实际分离的位点需要更大的群体才能检测到 尤其是偏分离的位点 。林木中 ,常用 ( ) F1 谱系和显性标记进行遗传连锁图谱构建 ,相应的作图策略为拟测交策略 Pseudotestcross strategy