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红球菌Rhodococcus sp. DS-3 dsz-ABC基因和dszD基因在大肠杆菌中的共表达.pdf

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红球菌Rhodococcus sp. DS-3 dsz-ABC基因和dszD基因在大肠杆菌中的共表达

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !(): # #% ’ #%( 年 月 日 #$$ ! ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! )*+,- #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 红球菌 ./(0((12 ! # $%’ 023 ()* 基因和 023 $ 基因 在大肠杆菌中的共表达 李国强,马 挺,李京浩,李 红,刘如林 (南开大学生命科学学院 天津 7$$$%C) 摘 要:二苯并噻吩( )及其衍生物微生物脱硫的 途径需要 个酶( , , )参与催化。其 EF3 !G ! EHI) EHIF EHI2 :=@ EHIE 中 单加氧酶( )和 砜单加氧酶( )都是黄素依赖型氧化酶,它们的催化反 EF3 EHI2 ;+ EF36/J EF36 EHI) ;+ EF3J 6/J # 应需要菌体中还原型的黄素单核苷酸( ), 由辅酶黄素还原酶( )再生。因此,共表达 , , 1/KL 1/KL EHIE EHI) EHIF # # EHI2 和 EHIE 可以提高整个脱硫途径的速率。构建了两个不相容性表达载体*F)EE 和*:K# 并在大肠杆菌中实现 了 个脱硫酶基因的共表达。 , , 和 的可溶性蛋白表达量分别占菌体总蛋白质的 , ! EHI) EHIF EHI2 EHIE % M N , 和 。共表达时的脱硫活性是单独用 表达时的 倍,并对工程菌休止细胞脱除模拟柴油中 7 M N 7 M CN C5N *:K# M! EF3 的活性进行了研究。 关键词:红球菌;二苯并噻吩;脱硫基因;不相容质粒;共表达 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) O%5 ) $$$C6#$( #$$ $#6$#%6$ 化石燃料中含硫化合物的燃烧是环境污染的一 源基因编码的但是两者都能提高工程菌的脱硫活 个重要来源,降低油品中的硫含量是世界各国急需 性。因此,证明黄素还原酶也是微生物脱硫的一个 [] 解决的问题。生物脱硫(

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