- 1、本文档共4页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
六倍体柿品种‘藤原御所’杂交后代中九倍体新种质的获得
六倍体柿品种‘藤原御所’杂交后代中九倍体
新种质的获得1
房剑锋,张青林,罗正荣
华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,武汉(430070 )
E- mail :luozhr@
摘 要:本实验采用‘禅寺丸’ (Diospyros kaki Thunb. ‘Zenjimaru’, 2n=6X=90 )花粉与‘藤原御
所’ (D.kaki ‘Fujiwara-gosho’, 2n=6X=90 )杂交,通过幼胚培养获得了一批再生植物。其中,
有 1 株与对照相比,叶片气孔孔径增大、密度降低;叶片DNA 含量为对照的 1.53 倍。因此,
可初步确定为九倍体。
关键词:柿,藤原御所,九倍体植株
中图分类号:S665.2
1. 引言
柿属植物(Diospyros spp. )倍性复杂,有天然存在的二倍体,四倍体,六倍体和九倍体,
但栽培柿(Diospyros kaki Thunb. )中的完全甜柿(pollination-constant nonastringent persimmon,
PCNA )则全部是 6 倍体(2n =6X =90 )有核品种(杨勇等,1999;唐仙英等,2000 )。甜
柿的多籽性不仅降低其鲜食价值,对柿饼、柿干等加工也极为不利。前人研究表明,少数无
核柿品种,如‘平核无’、‘渡泽’、‘宫崎无核’等则为 9 倍体(2n =9x =135),表现为三倍体的
染色体行为和伪单性结实特性,且生长发育正常(Zhuang et al. ,1992)。但迄今尚未发现无
核的甜柿品种。Sugiura 等(2000 )采用‘禅寺丸’2n 花粉授粉‘次郎’并结合幼胚培养,成功地
获得一批 9 倍体再生植物。但 2n 花粉供体少、花粉生活力和受精竞争力较弱,应用于育种
实践还存在一些没有解决的问题。Tao 等(2003 )发现‘藤原御所’中存在高频率2n 卵。天然
九倍体和 2n 卵的发现,为甜柿 2n 配子育种开辟了新的途径。我们采用‘禅寺丸’花粉与‘藤原
御所’杂交并结合幼胚培养和倍性鉴定技术,以期为建立中国甜柿 2n 配子育种技术体系奠定
基础。
2. 材料与方法
2.1 材料
供试母本为完全甜柿‘藤原御所’ (D. kaki Thunb. ‘Fujiwaragosho’ ),活体保存在中国林业
科学院亚热带林业研究所柿圃(浙江富阳);父本为不完全甜柿‘禅寺丸’ (D. kaki Thunb.
‘Zenjimaru’),其花粉采自武汉市林业科技推广站郑店品种圃。
2.2 方法
2.2.1 花粉收集及其生活力检测
晴天上午采集含苞待放花蕾,室内剥取花药,25~28℃下阴干,待花药散开后收集花粉
在 4 ℃和干燥条件下保存备用。花粉生活力检测采用悬滴培养法(谷晓峰等,2000 ),随机
观察 6 个视野统计花粉发芽率,每视野花粉不少于 60 粒;以花粉管长度超过花粉直径作为
发芽的直观标志。
1本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金(20030504014 )的资助。
-1-
2.2.2 花粉在柱头上萌发观察
授粉 24 小时后取 10 朵雌花置于固定液(甲醇:乙酸﹦3 :1)中固定。花粉管苯胺兰染
色参考谷晓峰等(2002 ),在 Olympus AH -3 型显微镜下荧光检测。
2.2.3 幼胚培养
授粉后 60 天采取幼果和摘取幼胚进行胚抢救培养。具体程序参考谷晓峰等(2001 )。
2.2.4 植株倍性鉴定
气孔密度及其口径大小观察参照刘明智等(2005 )。采用 PA 倍性分析仪(Ploidy
Analyser-I ,Partec )测定叶片 DNA 相对含量,具体方法参考陈绪中等(2004 )。以染色体
数 2n=90 的‘罗田甜柿’组培苗为对照,数据分析采用 Partec 公司 DPAC 软件(Data
文档评论(0)