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激光捕获显微切割_单细胞PCR技术的应用研究.pdf

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激光捕获显微切割_单细胞PCR技术的应用研究

第 31卷第 5期 第  三  军  医  大  学  学  报 Vol. 31, No. 5 464 2009年 3月   ACTA  ACAD EM IA E M ED IC INA E M IL ITAR IS TER TIA E   M ar. 2009 技术方法 文章编号 :(2009) 04 0464 03 激光捕获显微切割 单细胞 PCR技术的应用研究 1 2 1 1 3 4 1 1 ( 匡晓燕 ,陈 芳 , 郭家林 , 陈  倩 , 李龙萍 , 王全义 , 邓  飞    遵义医药高等专科学校病理科 , 贵州 遵义 2 3 4 563002 , 遵义医学院附属肿瘤医院肿瘤科 ,贵州 遵义 563003; 遵义市妇女儿童医院病理科 ,贵州 遵义 563000; 济宁医学院附属金 乡医院病理科 ,山东 济宁 272200 ) ( )   摘  要 : 目的 建立一套优化的激光捕获显微切割 单细胞聚合酶链反应 Po lym era se chain reaction, PCR 技术 ,应用 于分子组织学研究中单细胞基因的检测 。方法  从淋巴结反应性增生冷冻组织切片中 ,应用激光捕获显微切割获取 1~ β 10个淋巴细胞 ,采用优化的单细胞 PCR 反应体系和条件进行 珠蛋白基因检测 。结果  单轮常规 PCR 各组多细胞的扩 ( ) ( ) 增阳性率比较无显著性差异 P 005 ,而单细胞的扩增阳性率低于各组多细胞 ,有显著性差异 P 00 1 ;半巢式降落 ( ) 式 PCR 的单细胞扩增阳性率高于单轮常规 PCR ,有显著性差异 P 001 。结论  联合应用优化的激光捕获显微切割及 半巢式降落式 PCR 技术 , 显著提高了单细胞 PCR 的敏感性 、特异性和稳定性 。 ) ( 基因数据库 “http : / / gdbwww. gdb. org ”。具体见表 1。   激光捕获显微切割 la ser cap tu re m icrod issection , LCM )联合单细胞 PCR 技术应用于肿瘤基因组学的研

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