模拟交替低氧训练对大鼠骨骼肌线粒体呼吸链功能的影响.pdfVIP

3.6.1 大鼠体重监控 16 3.6.2 实验动物处死 16 3.6.3 骨骼肌线粒体的提取 17 3.7 测试指标及方法 17 3.7.1 血液相关指标的测定 17 3.7.2 线粒体蛋白质含量的测定 18 3.8 线粒体酶复合物 （Ⅰ～Ⅳ）活性的测定 19 3.8.1 酶复合物 Ⅰ(ComplexⅠ)活性测定 19 3.8.2 酶复合物Ⅱ(Complex Ⅱ)活性测定 20 3.8.3 酶复合物Ⅲ (Complex Ⅲ)活性测定 20 3.8.4 酶复合物Ⅳ(Complex Ⅳ)活性测定 20 3.8.5 结果计算 20 3.9 药品和试剂20 3.10 仪器21 3.11 数据处理21 4 实验结果 22 4.1 各组大鼠体重的变化22 4.2 各组大鼠血液中相关指标的比较22 4.3 各组大鼠骨骼肌线粒体酶复合物 Ⅰ―IV 的活性比较 24 4.3.1 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的 BSA 标准曲线 24 4.3.2 测定样本蛋白含量 24 4.3.3NADH 消光系数 25 4.3.4DCPIP 消光系数 25 4.3.5 细胞色素 C 消光系数 26 4.3.6 大鼠骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物 Ⅰ～Ⅳ的活性 26 5 分析与讨论 29 5.1 交替低氧训练对大鼠体重的影响29 5.2 交替低氧训练对大鼠 RBC、Hb 指标的影响29 5.3 交替低氧训练对大鼠骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物的影响 31 6 结论 33 参考文献 34 致 谢 39 摘 要 模拟低氧训练是近年来发展起来的一种新的科学训练方法，在运动训练中发挥着积 极的作用。本实验通过应用人工低压氧舱模拟高原训练方法，建立固定海拔 2500m、3500m 交替低氧训练的动物模型，研究不同海拔高度及其交替训练对大鼠骨骼肌线粒体呼吸链 功的影响。探讨骨骼肌线粒体呼吸链在不同海拔高度交替低氧训练刺激作用下其活性的 动态的变化，为高原训练海拔高度的选择以及低氧适应的研究提供参考。 实验方法 本实验选用健康雄性 Wister 大鼠，2 月龄，60 只体重在 130g 左右，由兰州中医学 院提供，根据动物适应性筛选，将保留的 50 只大鼠随机分为 5 组。常氧安静对照组(C)、 常氧运动组(E)、2500m 低氧运动组(2500E)、3500m 低氧运动组(3500E)、交替低氧运动 组(AE)，每组各 10 只，然后进行训练。其中常氧训练是以兰州 1500m 为基准，采用水 平动物跑台对大鼠进行 4 周常氧递增负荷训练，每周训练 6 天，休息一天。低氧训练时 氧分压分别为 15.4﹪和 13.6﹪，相当于海拔 2500m 和 3500m 高度。其中 2500m 和 3500m 训练组，住和训练均在各自的海拔高度中。交替训练组，每周训练 6 天 （每周前 3 天住 和练都在 2500m 处，后 3 天住和练都在 3500m 处），休息 1 天 （在 2500m 休息）。各组 大鼠均在最后一次训练结束，在常氧恢复生活 48 小时后取材。测定各组大鼠体重、血 液指标，及骨骼肌线粒体呼吸链酶复合物 Ⅰ～Ⅳ的活性。 实验结果 1.经过 4 周后各组大鼠与训练前相比体重均明显增加。与常氧安静组相比较，运动 组大鼠体重增长幅度均有显著性差异，表现出了一定下降趋势，而低氧组与常氧运动组 相比较没有显著性差异，说明说明长时间运动对体重有影响，低氧对大鼠体重没有大的 负面影响。但由于训练环境和方法的不同，低氧组大鼠体重均略低于常氧组大鼠体重， 可能是由于低氧的刺激，使训练消耗了更多的脂肪，而去脂体重相对增加，引起机体组 成成分发生改变所至。交替低氧组与其他低氧组之间没差异性。 2.与安静组 （C ）比较，各训练组血红蛋白含量均有显著性提高 （P0.01,P0.05 ）， 表现出一定的升高趋势，常氧训练组 （E ）、2500 低氧训练组 （2500E ）、3500 低氧训练 组 （3500E ）、交替低氧训练组 （AE ）分别提高了 1.46％、7.70