青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及胶原合成的影响.pdfVIP

青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及胶 原合成的影响 中文摘要 目的 观察青蒿琥酯对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)增殖及凋 亡影响及机制，观察青蒿琥酯对体外培养的人胚肺成纤维细胞胶原合成影 响及机制。 方法 用 0、1、10、100mg/L 浓度的青蒿琥酯作用于体外培养的人胚肺 成纤维细胞，定时用 CCK-8 法检测细胞增殖情况，用 Hochst33258 染色从 形态学上观察细胞凋亡，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率；取对数生长 期人胚肺成纤维细胞(HELF)系 HFL-I 细胞株，随机分为观察 1~3 组及对照 组，前三组分别加入浓度为 1、10、100mg/L 的青蒿琥酯，对照组加入等体 积培养液后继续培养 24h 后，收集细胞提取总 RNA ，RT-PCR 法测定 Bcl-2 mRNA 、Bax mRNA 和 Survivin mRNA 的表达；用 0、1、10、100mg·/L 浓 度的青蒿琥酯作用于体外培养的人胚肺成纤维细胞，用天狼猩红染色法检 测胶原蛋白的合成，用RT-PCR 法测定细胞 I 型和 III 型前胶原蛋白 mRNA 的表达。 结果 青蒿琥酯呈剂量和时间依赖性抑制 HFL-I 细胞的增殖(P0. 05)， 流式细胞仪检测结果显示，HFL-I 细胞 G0/G1 期细胞百分比逐渐上升，S 期细胞百分比逐渐下降，说明细胞阻滞于 G0/G1 期，G2/M 期百分比上升， 细胞凋亡率增加；Bcl-2 mRNA 及 Survivin mRNA 的表达显著低于对照组， Bax mRNA 的表达显著高于对照组；青蒿琥酯呈剂量依赖性降低胶原的生 成(P0. 05)，I 型和 III 型前胶原蛋白 mRNA 的表达显著低于对照组。 结论 青蒿琥酯可抑制人胚肺成纤维细胞的增殖，促进其凋亡，可能机 I 制为通过下调 Bcl-2 mRNA 和 Survivin mRNA 表达，上调 Bax mRNA 表达 抑制 HFL-I 细胞增殖、促进 HFL-I 细胞凋亡。蒿琥酯可在一定程度上降低 胶原的分泌，其机制可能通过下调 I 型和 III 型前胶原蛋白 mRNA 的表达从 而降低胶原的生成；表明青蒿琥酯有可能用于肺纤维化的防治。 关键词 青蒿琥酯；胚肺成纤维细胞；前胶原；凋亡；Bcl-2 mRNA ；Bax mRNA ；Survivin mRNA；RT-PCR II THE EFFECTS ON THE PROLIFERATION APOPTOSIS AND COLLAGEN SYNTHESIS OF HUMAN EMBRYO FIBROBLAST Abstract Objective To investigate the effects and mechanism of Artesunate on the proliferation and apoptosis of human embryo fibroblast, To investigate the effects of Artesunate on the collagen synthesis of human embryo fibroblast HFL-I. Method Human embryo fibroblasts were incubated with 0 、1、10、 100mg/L，at a scheduled time ，the proliferation activity of the human embryo fibroblasts was determined by CCK-8 assay，the morphology of apoptosis was observed by Hochst33258 staining. the cellcycle phase an