甲状腺球蛋白抗原固相放免法的建立及初步临床应用.pdf

第 12 卷 第 1 期 . 12　 . 1 同　位　素 V o l N o 1999 年 2 月 Journal of Iso topes Feb. 1999 甲状腺球蛋白抗原固相放免法的建立 及初步临床应用 沈江帆　张乃康　高克家 (上海市普陀区中心医院, 200062) 摘要　利用自制的甲状腺球蛋白(T g) 单克隆抗体, 建立了 T g 固相放射免疫分析方法, 其灵敏 度为 0 35 , 回收率达98% , 批内 4 1% , 批间 87% 。50 例健康人的 测定值为 1112 g L CV CV T g ±4 83 , 检测范围为 2 99～ 20 16 ; 同时对 140 例各种甲状腺疾病患者的血清 含量进 g L g L T g 行检测, 并与 T g 双抗法进行对比, 结果表明固相法检测范围明显较双抗法宽。 关键词　甲状腺球蛋白(T g) 　T gM cA b　固相放免分析　125 I 标记 中图法分类号　 446 6　 581　 817　 5122 R R R Q 甲状腺球蛋白(T g) 是由甲状腺合成的蛋白质, 测定血液中 T g 的含量, 对甲状腺功能亢进 以及分化型甲状腺癌的诊断、治疗效果评价有一定的价值。本院于 1986 年建立了 T g 双抗放 [ 1 ] 免法 。随着免疫分析技术的发展和单克隆抗体的产生, 有必要建立 T g 抗原固相放免法。 1　实验方法 11　Tg 抗原的制备 T g 抗原制备按文献[1 ]方法进行。分离、纯化的主要步骤包括: 取手术切下的甲状腺机能 亢进患者的甲状腺组织, 经冷冻、超声粉碎、超速离心、 纯化等步骤, 获得 抗原, 浓度 H PL C T g 为 8 。 相对分子量为 660000, 等电点 4 6, 沉降系数 27 , 聚丙烯电泳见一条区带。 g L T g s 12　Tg 单克隆抗体制备 经免疫、杂交、克隆、纯化等步骤, 获得三株T g 单克隆抗体, 抗体定型均为 T gG。用双抗体 法测定, T g 单抗经 1 ∶32 000 稀释, 0 管结合率为 58% ; 用本院自制血凝法 T g 抗体法测定, T g 单抗经 1 ∶51 200 稀释, 仍呈阳性。 13　125 - 单克隆抗体制备 I Tg 取三株单克隆抗体混合, 每次标记用量为 50 g。采用 Iodogen 法进行标记, 以001 m o l 7 125 ( L 的磷酸缓冲液作标记缓冲液, 将 50 g T g 单克隆抗体、37 ×10 Bq I 及缓冲液 总体积 沈江帆: 男, 48 岁, 副主任医师, 核医学专业 收稿日期:　修改稿收到日期: 　第 1 期　　　　　　　　　沈江帆等: 甲状腺球蛋白抗原固相放免法的建立