DNA测序技术概述.pdf

生 物 技 术 通 584 SRETIELIN11BIOTECHNOLOGY02。·一·．一…．…讯 Vol·22N04· Jul‘， 2UI 1．04．030 综 述 doi：10．3969／j．issn．1009-0002．201 DNA测序技术概述 占爱瑶，罗培高 四川农业大学农学院，四川雅安625014 [摘要]DNA测序技术作为现代生命科学研究的核心技术之一，自上世纪70年代中期DNA发明以来发展迅速。我 们简要综述现有的几代DNA测序技术的原理及其发展历程，并对未来可能出现的第三代测序进行预测。 [关键词】DNA测序；新一代测序；单分子测序；直接测序 [中图分类号]Q523[文献标识码]A [文章编号】 1009-0002(2011)04—0584—05 TheOverviewofDNA SequencingTechnology ZHANA Pei-Gao i—Yao，LUO of CoUegeAg而cultural，SichuanAgnculturalUniversity，Yaan625014，China [Abstract]DNA asoneofthecore ofmodemlifescienceresearchhas sequencingtechnology technology quickly sinceits mid一1970s．Inthisarticlewe summarizedthe several developed establishing,the mainly eu邛enflyexisting DNA thethird be technologies，itsevolution，andpredicted generationsequencingmayapper- generationsequencing airinthefuture． molecule DNA words】DNA technology；nextsequencing；singlesequencing；direct [Key sequencing generation sequencing 1944年，Avery通过肺炎双球菌转化实验证明1经典的DNA测序方法 DNA是遗传信息的载体11I。此后，人们一直致力于 DNA结构和序列研究，使得DNA测序技术应运而 20世纪70年代中期，2种不同的DNA测序方 生12-51。该技术对探索生命奥秘、治疗疾病，以及整个法几乎同时发表：Sanger等提出“DNA双脱氧链末 生物科学乃至医学的发展起到了巨大的推动作用， 端终止测序”，又称Sanger测序；Maxam等提出 并具有广阔的应用前景。 “DNA化学降解测序”问。前者是利用DNA聚合酶 DNA测序技术的发展经历了几个重要阶段：① I的聚合反应，在反应体系中引入一定比列的27， 经典的手工测序，主要依赖于一些生物化学方法和 3，_双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)作为终止剂，由于 电泳分离技术，包括Sanger测序和DNA化学降解 测序；②第一代测序技术，主要基于Sanger法的测 可以掺人新生单链中，而ddNTP的核糖基37碳原 序原理，结合荧光标记和毛细管阵列电泳技术来实 子上连接的是氢原子而不是羟基，因而不能与下一