碘标记血管紧张素Ⅱ放射免疫分析药盒说明书.doc

碘[125I]血管紧张素Ⅱ放射免疫分析药盒 【药品名称】 碘[125I]血管紧张素II放射免疫分析药盒 【概述】 血管紧张素Ⅱ(AⅡ)是由血管紧张素转换酶降解血管紧张素I而生成的8肽，并在酶作用下转变成血管紧张素Ⅱ。血管紧张素Ⅱ具有增强血管收缩能力和提升血压的功能，是肾素-血管紧张素系统的重要物质。在机体的血压、水和电解质平衡调节上起重要作用。血浆中血管紧张素Ⅱ含量的测定，为多种高血压和肾脏疾病的分型与诊断提供依据。 【测定原理】 本试剂盒采用匀相竞争放射免疫分析方法，直接测定人血浆中AⅡ的含量。先将校准品(或样品)、标记物和抗体按操作程序依次加入试管中，使标记抗原和抗原与限量抗体发生竞争性结合，待反应平衡后，加入分离剂，离心沉淀，使游离抗原与抗原抗体复合物分离，测量沉淀中放射性强度。随AⅡ含量增加，放射性强度减少。 【试剂组成和配制方法】 1.校准品 7瓶(冻干品) 每瓶用 ml缓冲液溶解，浓度分别为:0，25，50，100，200，400，800pg/ml 2.125I—AII 1-2瓶(红色冻干品)每瓶用5.5ml缓冲液溶解，3.5μCi/μg 3.抗体 1瓶(蓝色冻干品)使用前用 ml缓冲液溶解(如不填写100T 10ml溶解) 4.缓冲液 1瓶(液体) 5.分离试剂 1瓶(悬浮液) 使用前充分摇匀。 6.8-羟基喹啉 1瓶(液体)(与AI药盒合用) 7.二巯基丙醇 1瓶(液体)(与AI药盒合用) 8.EDTA-Na2 1瓶(液体)(与AI药盒合用) 9.质控血清 2瓶 冻干品 每瓶用前用0.5ml蒸馏水溶解 【样本要求】 1.酶抑制剂的配制:按取血5ml计每支采血管加入50ulEDTA-NA2(如果晶粒析出，可温热溶解)50ul 8-羟基喹啉和25ul二巯基丙醇，混匀，备用或2-8℃储存可用一周。 2.标本采集:按常规取静脉血5ml，迅速注入放在冰水浴冷却的酶抑制抗凝试管中，摇匀，立即放回冰水浴中冷却，待离心时取出。1000rpm离心5分钟(最好4℃离心机)，分离取出血浆，此操作应该在15分钟内完成，血浆备检或-25℃保存，可用2个月。 【适用仪器】 GC-2010γ放射免疫计数器、DMF-96型多管放射免疫计数器、γ放射免疫单管分析仪等。 【操作方法】 将圆底聚苯乙烯试管编号(按复管操作)，按下表程序操作: AⅡ加样测定程序表 单位:μl 试? 剂 NSB管 S0-S6校准管 样品管 生理盐水 200 200 200 缓冲液 300 ― ― 校准品 ― 200 ― 待测标本 ― ― 200 125I―AⅡ 100 100 100 AⅡ抗血清 ― 100 100 混匀，4℃放置15小时以上，任取3管测量，作为总放射性T(cpm)。 分离试剂 1000 1000 1000 充分混匀，4℃放置15分钟 3500 rpm离心(离心力1500g)15分钟，立即吸去上清液，测各管沉淀的放射性计数(cpm)。 【数据处理】 以B/B0%为纵坐标，以校准品浓度为横坐标，在Logit-Log坐标纸上绘制校准曲线，根据样品B/B0%，从校准曲线上查出样品的含量，目前多用于自动γ计数仪预先编制的程序直接给出有关参数、校准曲线及样品浓度。 【质量控制】 对质控血清的测定在允许范围内。 【方法的局限性】 本药盒仅用于血浆样本的测定，对其它体液样本测定的可靠性尚未得到充分的实验确认。 【对实验结果的解释】 本药盒的检测结果不是临床适应症的唯一确认指标，其临床意义需结合其它检测指标及临床表现具体分析判断。 【有效期】 2-8℃避光保存效期30天。 【注意事项】 1.使用本药盒的实验室应具有“放射性同位素使用许可证”，使用过程中产生的放射性废物应按国家有关规定处理。 2.本药盒内不同批号的试剂不能混用，同一批号的试剂可混合均匀后使用。 3.各试剂必须摇匀后使用，使用前应平衡到室温(15-28℃)。 4.离心后吸弃上清液时注意不要损失沉淀。 5.标记物和校准品溶解使用后应该冰冻保存。 【包装规格】 100T/盒