分子肿瘤-课件.pptVIP

P53与 肿瘤基因治疗 微生物专业 张彦玲 肿瘤抑制基因存在的证据 p53的发现过程与简介 p53与肿瘤基因治疗 腺病毒法 肿瘤抑制基因存在证据 细胞遗传学： 肿瘤细胞系 + 正常细胞系 肿瘤抑制基因存在证据 P53基因介绍 P53基因有野生型(wild-type p53,wtp53)和突变型(mutant-typep53,mtp53)两 种，wtp53可参与细胞周期的调空，在维持细胞增长、抑制肿瘤增殖过程中起重要作用。当其转变为mtp53时，则失去对细胞生长的抑制作用，促进细胞转化和过度增殖，导致肿瘤的发生. p53 与 肿 瘤基因治疗，是以正常的野生型p53基因替代肿瘤细胞中突变p53基因。主要方法是利用基因转染肿瘤细胞向细胞内导人外源基因的方法，可分为非病毒法和病毒法两种。 非病毒法：是脂质体包埋法 病毒法：以反转录病毒为载体，这种研究开展较早，并已有研究设计出能整合在人喉癌细胞染色体上，恢复p53基因的功能，抑制人喉癌生长。但由于反转录病毒只能感染分裂细胞，而且感染率较低，目前腺病毒载体更常用作p53转移的载体。 基因枪技术：利用基因枪将外源p53基因介导人癌 细胞，发挥其抑癌功能，抑制转染细胞的恶性生长。 腺病毒法 腺病毒对啮齿类动物有致癌能力，使细胞转化只需要腺病毒基因组的一部分。尽管腺病毒分布很广，但对人体不出现致癌性。人体细胞是一类允许细胞(permissive cell)，即这类细胞允许感染入侵的病毒在细胞内复制增殖，最后细胞裂解死亡而释放出大量子代病毒。在体外培养的多种人体肿瘤细胞中均未查出腺病毒颗粒。 腺病毒作为载体+P53基因？  结论和展望 随着人们对p53更深入的认识、对小分子研究进展和药物的发现、对恶性肿瘤标志物的了解和掌握，我们对p53的肿瘤治疗作用更加有信心。 此外，p53靶向治疗也存在一些问题。例如，如何消除野生型p53对肿瘤的次级选择，而不是下游区缺陷途径；怎样将肿瘤治疗过程中的不良反应降到最小。因此，下一代治疗药物的产生将依赖于更进一步的技术发展和对p53依赖途径的进一步深入了解。 Thank you ! * * 主要内容 PEG 正常杂交细胞 结论推测：正常细胞系中必定含有压制癌基因的基因 杂交细胞是不稳定的 任意丢失 染色体 部分杂交细胞获得癌细胞表型 第17染色体在癌细胞表型里丢失 肿瘤抑制基因存在于第17染色体里 正常细胞的第17号染色体导入到肿瘤细胞中 肿瘤细胞重新变为正常细胞 提示：肿瘤抑制基因的存在 P53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因。 ???? 抑制肿瘤基因—p53发现与简介 癌蛋白抗原 癌基因 抑癌基因 p53基因是重要的肿瘤抑制基因,定位于人类染色体17p13·1位点,长约20 Kb,由11个外显子和10个内含子组成。p53基因编码395个氨基酸残基组成的蛋白在细胞周期调控DNA修复和诱导细胞凋亡等方面均具有关键性作用。人类50%以上的肿瘤组织中存在p53基因突变,是所检测到的最常见的基因突变。 较常见的失活形式是一个等位基因丢失，而另一个则由于突变而失活，即所谓的杂合性丢失(loss of heterozygosity） 在一个基因座位上，两个等位基因都发生突变或缺失（失活），才是致癌性的。 但p53，当其一个等位基因发生突变时，不但其本身丧失抑癌功能，而且还能对另一个正常等位基因所表达的蛋白代谢产物起抑制作用。这种情况称之为“显性负效应”。 引起肿瘤形成或细胞转化的P53蛋白是P53基因突变的产物，是一种肿瘤促进因子，它可以消除正常P53的功能，而野生型P53基因是一种抑癌基因，它的失活对肿瘤形成起重要作用。 基于p53在肿瘤发生发展中的重要作用,提示了可以将具有正常功能的野生型p53基因导入肿瘤细胞中,重建失活的抑癌基因功能,恢复细胞的正常生长表型,或者诱导细胞凋亡,达到控制肿瘤细胞异常生长的目的 p53与肿瘤基因治疗 野生型腺病毒基因 重组RAd-p53