选修一 微生物.ppt

思考：怎样证明此培养基具有选择性呢？ 以尿素为 唯一氮源 的培养基 牛肉膏 蛋白胨 培养基 ?是 分离 尿素 细菌 判断该 培养基 有无选 择性 实验组 对照组 培养基类型 是否 接种 ?目的 ?结果 只生长尿素细菌 生长多种微生物（菌落数明显大于选择培养基） 是 土壤取样 样品的稀释 涂布平板与培养 观察并记录结果 计算平均菌落数 3.实验流程： 4.设置对照： P23 实例分析 原因：（1）土样不同 （2）培养基被杂菌污染 （3）培养基中混入了其他的含氮物质 方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验 方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。 结果预测：如果结果与A同学一致，则证明A无误； 如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基的配 制有问题。 2、分解纤维素的微生物的分离 1.菌种来源：富含纤维素的土壤 2.培养基： 选择：以纤维素为唯一（主要）碳源 鉴别：以刚果红为指示剂 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以___________________为中心的________，我们可以通过____________________来筛选纤维素分解菌。 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌？ 根据生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 〖旁栏思考题〗 将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？ 人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。 将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。 〖旁栏思考题〗 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 3.实验流程： 1、纤维素分解菌选择培养基属于______（固体、液体）培养基，原因是____________________。 P29【资料二】选择培养 阅读资料二“选择培养基”，回答以下几个问题： 液体 没有添加琼脂成分 2、该培养基对微生物________（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是 ____________________________ ___________________________， 以纤维素粉为主要碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖 具有 若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将__________改为_________。 3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？ 葡萄糖 纤维素粉 选择培养的操作方法 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。 实验流程中“选择培养” 的目的是什么？ 其目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。 为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。 〖旁栏思考题〗 【资料三】刚果红染色法 方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应 方法二：在倒平板时就加入刚果红 染色法 优点 缺点 方法一 方法二 颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂 操作简便，不存在菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈; 有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。 思考：这两种方法各有哪些优点与不足 为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____________实验，纤维素酶的发酵方法有______ 发酵和______ 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的________ 含量进行定量测定。 发酵产纤维素酶 液体 固体 葡萄糖 1、稀释涂布平板法： 应用： 原理： 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生 长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一 个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能 推测出样品中大约含有多少活菌。 注意： 一般选择菌落数在30~300的平板进行记数 统计样品中活菌的数目