二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白bcl2、bax.PDF

世界中医药　２０１７年４月第１２卷第４期 ·８６５· 二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞 凋亡调控蛋白ｂｃｌ２、ｂａｘ表达的影响 杨　蕾　王继峰　牛建昭　赵丕文　孙丽萍　陶仕英　武洪波　蔡欣悦　齐明月 （北京中医药大学，北京，１０００２９） 摘要　目的：观察二仙汤含药血清对顺铂干预的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白ｂｃｌ２、ｂａｘ表达的影响，从细胞凋亡的角 度探讨二仙汤含药血清对卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制。方法：２２～２４ｄ的ＳＤ雌性大鼠３０只，随机分为３组，分别为生 理盐水组，补佳乐组，二仙汤组。每组大鼠１０只。给药４ｄ后处死大鼠，心脏取血，制备药物血清。２２～２４ｄ的ＳＤ大鼠卵 巢颗粒细胞，经培养贴壁后，用顺铂损伤大鼠原代卵巢颗粒细胞。经各组药理血清作用后，应用放免法，进行雌激素和孕 激素水平测定及分析。应用免疫组化法，测定各分组ｂｃｌ２、ｂａｘ蛋白的表达情况，并进行图像分析。结果：放免结果显示， 与正常组相比，模型组和补佳乐组Ｅ表达明显改变，有统计学意义（Ｐ＜００５）。与模型组相比，补佳乐组、二仙汤组Ｅ表 ２ ２ 达均有增加；与正常组相比，模型组Ｐ表达水平有所变化，有统计学意义（Ｐ＜００５）。与模型组相比，二仙汤组Ｐ表达略 高于补佳乐组，但低于正常组。免疫组化结果显示，在卵巢颗粒细胞细胞质上可见ｂｃｌ２和ｂａｘ蛋白表达的棕黄色颗粒。 和正常组相比较，顺铂干预后各组ｂｃｌ２表达均减弱，而以模型组最明显，有统计学意义（Ｐ＜００５）；和模型组比较，各药 物组均可见ｂｃｌ２阳性表达增加，但弱于正常组，有统计学意义（Ｐ＜００５）。ｂａｘ与ｂｃｌ２表达强度结果相反，和正常组比 较，顺铂干预后的各组ｂａｘ均表达增强，模型组呈现极强表达现象，有统计学意义（Ｐ＜００５）；和模型组比较，各药物组均 可见阳性表达减弱，但表达高于正常组，有统计学意义（Ｐ＜００５）。结论：二仙汤能降低经顺铂干预后大鼠ｂａｘ蛋白在卵 泡颗粒细胞表达，增强ｂｃｌ２蛋白的表达，二仙汤能够通过调节凋亡蛋白ｂｃｌ２、ｂａｘ蛋白的表达，抑制卵巢颗粒细胞发生凋 亡，从而保护卵巢功能。 关键词　二仙汤；顺铂；颗粒细胞；细胞凋亡 ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＥｒｘｉａｎＤｅｃｏｃｔｉｏｎＳｅｒｕｍｏｎＲｅｇｕｌａｔｉｎｇＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＰｒｏｔｅｉｎｂｃｌ２ａｎｄｂａｘ ｉｎＲａｔＯｖａｒｉａｎＧｒａｎｕｌｏｓａＣｅｌｌｓＡｐｏｐｔｏｓｉｓＩｎｄｕｃｅｄｂｙＣｉｓｐｌａｔｉｎ ＹａｎｇＬｅｉ，ＷａｎｇＪｉｆｅｎｇ，ＮｉｕＪｉａｎｚｈａｏ，ＺｈａｏＰｉｗｅｎ，ＳｕｎＬｉｐｉｎｇ，ＴａｏＳｈｉｙｉｎｇ，ＷｕＨｏｎｇｂｏ，ＣａｉＸｉｎｙｕｅ，ＱｉＭｉｎｇｙｕｅ （ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００２９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｓｅｒｕｍｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＥｒｘｉａｎｄｅｃｏｃｔｉｏｎｏｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｂｃｌ２ａｎｄｂａｘｐｒｏ ｔｅｉｎｆｒｏｍｒａｔｓ′ｏｖａｒｉａｎｇｒａｎｕｌｏｓａｃｅｌｌｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｃｉｓｐｌａｔｉｎａｎｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＥｒｘｉａｎＤｅｃｏｃｔｉｏｎｓｅｒｕｍｏｎａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆｏｖａｒｉａｎｇｒａｎｕｌｏｓａｃｅｌｌｓｆｒｏｍｔｈｅｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｉｒｔｙＳＤｆｅｍａｌｅｒａｔｓｆｏｒ２２ｔｏ２４ｄａｙｓｂｉｒｔｈｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓ：ｔｈｅｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅｇｒｏｕｐ，ｐｒｏｇｙｎｏｖａｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅＥｒｘｉａｎＤｅｃｏｃｔｉｏｎｇｒｏｕｐｗｉｔｈ１０ｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ａｆ ｔｅｒ４ｄａ