叶酸靶向载顺铂羧甲基-β-环糊精纳米复合物的-中国细胞生物学学报.PDF

网络出版时间：2013-12-20 16:59 网络出版地址：/kcms/doi/10.11844/cjcb.2014.01.0304.html 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2014, 36(1): DOI: 10.11844/cj cb.2014.01.0304 叶酸靶向载顺铂羧甲基-β-环糊精纳米复合物的 制备及对鼻咽癌的体外抑制效应 1 2 3 1* 刘 涛 马 栋 柯 波 谢民强 1 2 ( 南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉头颈外科, 广州510282; 暨南大学生物医学工程系, 广州510630; 3江西省人民医院江西血液肿瘤细胞生物学重点实验室, 南昌330006) 摘要 为达到鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC) 的靶向化疗, 该研究通过酰胺化 反应和配位偶联技术制备叶酸(folic acid, FA)分子靶向载顺铂(cisplatin, CDDP)羧甲基-β-环糊 精(carboxymethyl-β-cyclodextrin, CM-β-CD)纳米复合物(FA-CM-β-CD-CDDP), 采用邻苯二胺 (o-phenylenediamine, OPDA) 比色法检测复合物中CDDP含量, 紫外分光光谱检测FA含量, 透射电镜 观察复合物形态, 激光粒度仪测定复合物粒径大小。荧光显微镜观察NPC叶酸受体(folate receptor, FR) 阳性HNE-1细胞及FR 阴性CNE-2细胞对偶联FITC的复合物的吞噬及OPDA 比色法检测细胞内 CDDP的浓度。通过MTT法、集落形成实验和流式细胞术检测复合物对HNE-1细胞增殖能力和凋 亡的影响。研究结果显示, 复合物中偶联的FA和CDDP浓度分别为340 µg/mL和2 mg/mL, CDDP 包 封率达20.00%, 复合物粒径均匀且大小为157.8 nm 。HNE-1细胞内见较多FITC, 细胞内CDDP浓度 为6.24 ng/mL, 而CNE-2细胞内FITC较少, 细胞内CDDP浓度仅约2.01 ng/mL 。HNE-1生长抑制率在 24 h 明显高于对照组(CM-β-CD-CDDP), 其IC50(4.80 µg/mL) 明显低于对照组(6.97 µg/mL), 但当所 载的CDDP终浓度达到16.00 µg/mL, 两组抑制率均达到80%以上; 作用48 h 两组抑制率无明显差异。 在24 h, 当复合物的CDDP终浓度为1.00 µg/mL时, HNE-1的集落形成率为33.2 1%, 明显低于对照组 (52.27%) 。当复合物的CDDP终浓度为0.25 µg/mL和1.00 µg/mL 时, HNE-1的凋亡率分别达12.65% 和22.35%, 明显高于对照组(6.91%和14.2 1%) 。研究结果表明, 成功构建的FA-CM-β-CD-CDDP纳米 复合物能够靶向抑制FR 阳性的NPC细胞增殖并促进其凋亡。 关键词 叶酸; 分子靶向; 纳米复合物; 鼻咽癌; 顺铂