119例慢性髓细胞白血病急变期核型分析论文.docVIP

　　119例慢性髓细胞白血病急变期核型分析论文 朱雨，李建勇，潘金兰，吴炜，仇海荣， 吴亚芳，杨慧，张建富.freelia at Blast Crisis Department of Hematology, The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Jiangsu Province People Hospital, Nanjing 210029, China; 1The First Affiliated Hospital of Soochoatology,Suzhou 215006, China AbstractTo investigate the karyotype of chronic myeloid leukemia in blast crisis (CML-BC), karyotype analysis ed osome 9 deletions in randomly selected 28 cases of them. The results shople variant translocation and 5 cases (4.0% ) osomal abnormalities,.freelost mon ones being i(17q) and +14. 72.3% of Ph positive CML-BC had extra cytogeic changes and +Ph, +8, i(17q) ost frequent. The average time betonths (range 2 to 66 months) for Ph negative cases and 34.2 months (range 1 to 127 months) for Ph positive cases. 5 cases (5/28,17.9%) osomal abnormalities are mon in CML-BC patients and FISH can effectively detect the der(9) deletions. key yeloid leukemia; CML-BC; karyotype analysis; derivative chromosome 9 deletion 慢性髓细胞白血病（CML） 是一种起源于多能造血干细胞的血液系统恶性疾病，占白血病总数的15%-25%，Ph染色体被认为是CML的特异性标志。在临床上患者一般在确诊2-5年内由慢性期进展到急变期（blast crisis, BC），慢性期时对化疗反应良好，进入急变期后化疗有效率不超过30%，生存期短，预后极差。CML病程中出现新的染色体异常克隆预示急变已得到广泛认可，进入急变期后附加染色体出现频率高、种类多，本研究对119例进入急变期的CML患者的核型进行了分析。 材料和方法 病例来源 119例CML-BC患者，其中男85例，女34例，男女比为2.5∶1，中位年龄40.6岁。CML诊断及分期标准参照张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》（第二版）［1］。所有119例患者均行常规核型分析，其中随机选取28例标本作荧光原位杂交（FISH），以检测是否有衍生9号染色体［der(9)］缺失，取5例正常人骨髓作对照。 核型分析 119例患者中有5例在CML-BC期做了2次染色体检查，共有124例次核型资料，其中51例核型变化资料为定期复诊患者从初发病到急变及继续治疗后的核型变化资料。在上述51例中4例急变后行异基因造血干细胞移植。全部病例均采用直接法及不加植物血凝素的短期培养法制备染色体标本，然后采用改良的热处理姬姆萨R显带技术分析20-40个分裂中期细胞核型，并参照《人类细胞遗传学国际命名体制［IS(1995)］》加以描述［2］。 荧光原位杂交 取出-20℃冰箱内保存的R 显带后细胞,换用新鲜的甲醇/冰醋酸（3∶1）固定液，气干法滴片，在普通光学显微镜下找到中期细胞。37℃ 2×SSC中老化30分钟，依次以70%、85%、100%的乙醇梯度脱水，每梯度2分钟。72℃甲酰胺中变性2分钟，再70%、85%、100%冰乙醇梯度脱水，每梯度2分钟，晾干。暗环境中取BCR-ABL双色双融合DNA易位探针1.0 μl(美国Vysis公司产品)、双蒸馏水2.0 μl、杂交稀释液7.0 μl于Eppendorf管中，离心、混匀，72℃水浴变性5分钟。每杂交区加10 μl上述反应液，盖上玻片并封胶4周。标本置于湿盒杂交16-18小时（37℃）。杂交后移去盖玻片，72℃ 0.3% triton/ 0.4×SSC洗液中洗2分钟，再于0.1% trit