135Hz极低频电磁场对Hep G论文.docVIP

　　135Hz极低频电磁场对Hep G论文 黄小军，杨家骥，王春梅，黄晓峰，李珍，曹云新，于华，王爽.freelely loagic field 【Abstract】AIM: To investigate the effects of exposure to extremely loagic field (ELF) on the groeasured respectively by methe thiazolyl tetrazolium (MTT) reduction assay and floetry. The ultrastructural changes ission electron microscopy. RESULTS: The absorbent value（A） arkably decreased e (P 0.01). The G1 stage of the Hep G2 cells exposed to ELF e. As shoission electron microscopy, the treated cells orphologies: apoptotic cells shrank, formed blebs, a membrane and cellular organelles remained intact. In the nucleus, the chromatin condensed at the nuclear membrane. The cells disintegrated into apoptotic bodies. CONCLUSION: Exposure to 135Hz ELF can inhibit the viability of Hep G2 cells and induce cell apoptosis. 【Keyely loagic fields; apoptosis; Hep G2 cells 【摘要】 目的： 观察135Hz极低频电磁场（ELF）照射对Hep G2细胞生长及凋亡的影响. 方法： 用MTT比色法、流式细胞仪，检测经135Hz ELF照射6, 12, 24 h后相应时间点细胞的活性、细胞周期、凋亡细胞的比例，并用扫描电镜以及透射电镜观察细胞超微结构变化. 结果： ELF磁场暴露后，与相应对照组相比其A值均下降（P 0.01），细胞活性随照射时间延长而下降（P 0.01）；使Hep G2细胞G1期阻滞，凋亡率随照射时间延长逐渐增高. 扫描电镜以及透射电镜观察到实验组细胞几种特殊的形态学特征： 凋亡细胞收缩，出泡，质膜及细胞器保持完整. 染色质浓缩于核膜，最后，细胞解离成凋亡小体. 结论： 135Hz的ELF照射抑制Hep G2细胞生长并促进其凋亡. 【关键词】 极低频电磁场；细胞凋亡；Hep G2细胞 0引言 手提电话、计算机等家用电器方便人们生活的同时所产生的极低频电磁场(ELF)越来越引起人们的广泛关注. 如何诱导肿瘤细胞发生凋亡，成为治疗肿瘤的主要研究思路之一［2］.Simko等［3］报道ELF持续照射可诱导肿瘤细胞凋亡. 研究表明细胞内游离Ca2+的浓度与细胞凋亡密切相关［4］，胞内高浓度的Ca2+可以激活内源性核酸内切酶从而导致细胞发生凋亡［5］. 我们采用流式细胞仪技术、MTT法、扫描电镜以及透射电子显微镜对细胞周期、细胞活性、凋亡率及细胞超微结构进行观测. 1材料和方法 1.1材料 人肝癌Hep G2细胞，由病理教研室隋延仿教授惠赠. 主要试剂： 10 mL/L四氧化锇（美国FISHER SCIENTIFIC.CO），丙酮（天津化学试剂有限公司），EPON812（天津化学试剂有限公司），乙腈（天津博迪化工有限公司），醋酸双氧铀（LKBProdukter AB, Bromma）. 主要仪器：流式细胞仪（美国Couter ELITE ESP型）， JEE4X真空蒸发仪（日本电子公司），JFC1100离子溅射仪（日本电子公司）， S520扫描电子显微镜（日本 Hitachi）， LKBNova超薄切片机（瑞典）， JEM2000EX透射电子显微镜（日本电子光学公司）. 1.2方法 1.2.1Hep G2细胞培养将Hep G2细胞按照2.5×108/L 密度接种于带孔的培养皿以及培养瓶中，以完全培养基(10 mL/L胎牛血清，青、链霉素1×105 U/L) 送入50 mL/L CO2的培养箱，37℃常规培养. 1.2.2实验分组将细胞随机分为6组，实验组为3组，分别是6, 12,.freelagic cell，横电磁波传输小室)中，小室内温度被控制在（35.2±0.2）℃，并保持恒温. 将频率调至135Hz，电场强度为80