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第二章血液一般检验 BLOOD ROUTINE TEST 第一节 红细胞检查(二) 定义: 嗜碱性点彩红细胞(basophilicstipplingcell)是不完全成熟的红细胞胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱性染料(如美蓝)染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以瑞氏染色,则在粉红色的胞质中见到大小,形状不一紫红色或蓝黑色颗粒,故名嗜碱性点彩红细胞。 嗜碱性点彩红细胞计数 [检测原理] 点彩红细胞计数(basiphilic stippling count),用碱性美蓝液作血涂片染色,红细胞呈淡蓝绿色,颗粒显深蓝色;用瑞氏染色,颗粒呈蓝黑色。 通常在油镜下计数1 000个红细胞中的点彩红细胞数,换算成百分率。 [方法学评价] 点彩红细胞计数操作目前仍用显微镜血涂片染色的传统检查法。必要时可扩大红细胞计数的数量。例如,先计数50个视野中点彩红细胞数,同时计数5个视野内红细胞总数,再按下式求出点彩红细胞的百分比。 50个视野中点彩红细胞数 点彩红细胞%=———————————— 5个视野内红细胞总数×10 [质量控制] 计数时必须选择红细胞分布均匀的区域计数。 [参考值] 0.03% [临床意义] 点彩红细胞计数增高主要见于: 1.中毒患者 如铅、汞、银、铋等金属中毒及硝 基苯、苯胺等中毒时,点彩红细胞显著增高。 2.各类贫血 如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、 恶性贫血、恶性肿瘤等,此时网织红细胞增加 常表示造血旺盛。 网织红细胞(reticulocyte,Ret)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞, 胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA),经煌焦油蓝等活体染色后,嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒,连缀成线,线连接成网。 属于尚未完全成熟的红细胞(当嗜碱性物质消耗殆尽后才被视为成熟红细胞),一般为8~9.5μm。 七、网织红细胞计数 [检测原理] 1.普通光学显微镜法 活体染色(新亚甲蓝或煌焦油蓝)的碱性着色基团 网织红细胞RNA的磷酸基(带负电荷) RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩, 蓝色的点状、线状或网状结构 , 显微镜下计数1000个红细胞中所占的网织红细胞数,以百分比或分数数表示。 [检测原理] 流式细胞仪法 2.仪器法 网织红细胞计数仪 血液分析仪法。 荧光染料与网织红细胞中RNA结合, 发出特定颜色的荧光进行RNA定量 精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret%)。 将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞 比率(HFR 、MFR、 LFR) 并计算网织红细胞其他参数。 血液分析仪法 提供与网织红细胞相关的多个参数, 网织红细胞绝对值、 网织红细胞百分比、 网织红细胞平均体积、 网织红细胞血红蛋白分布宽度、 网织红细胞血红蛋白浓度、 网织红细胞平均血红蛋白浓度、 LFR、MFR、HFR、 网织红细胞成熟指数。 【质量保证】 以手工计数法为重点。 1.染料选择 【质量保证】 2.正确辨认网织红细胞 外周血中网织红细胞主要为Ⅳ型,凡含有2个以上 网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞。 3.网织红细胞计数方法 (1)Miller窥盘: (2)显微成像系统:计算机和细胞形态分析软件, ①HFR:粗颗粒堆积成网状。 ②MFR:粗颗粒在10个以上,或细小颗粒超过15个。 ③LFR:细胞内含15个以下细小颗粒 ①网织红细胞百分数: 成人和儿童:0.005~0.015 新生儿: 0.02~0.06 ②网织红细胞绝对数: 成人和儿童: (24~84)X109/L 参考值 临床意义 1.评价骨髓增生能力,判断贫血类型。(1)网织红细胞增多:表示骨髓造血功能旺盛, 各种增生性贫血 (2)网织红细胞减少:常见于再生障碍性贫血 (3)鉴别贫血: 临床意
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