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表达载体pHAT2图谱及序列信息.pdf

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表达载体pHAT2图谱及序列信息

EMBL Protein Expression and Purification Facility pHAT2 - His-tagged expression vector Features position T7 promoter 1-17 Lac operator 21-42 T7 gene 10 ribosome binding site 50-80 His-tag 92-109 Polylinker 111-179 SP6 promoter 184-202 T7 transcription terminator 281-322 LacI gene 732-1813 (reversed) -Lactamase gene 2583-3433 Origin of replication 3507-4203 Reference: Peränen J., Rikkonen M.,Hyvönen M. Kääriäinen L. (1996) T7 vectors with modified T7lac promoter for expression of proteins in Escherichia coli . Anal. Biochem. 236 , 371-373. pHAT2 T7 promoter -- Lac operator XbaI ATTAATACGACTCACTATAGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCTCTAGAAATAATTTT TAATTATGCTGAGTGATATCCCTTAACACTCGCCTATTGTTAAGGAGATCTTTATTAAAA rbs His-tag NcoI GTTTAACTTTAAGAAGGAGATATATCCATGAGTCATCACCATCACCATCACTCCATGGAT CAAATTGAAATTCTTCCTCTATATAGGTACTCAGTAGTGGTAGTGGTAGTGAGGTACCTA METSerHisHisHsiHisHisHisSerMetAsp EcoRI SalI XhoI BamHI NotI NsiI HindIII ATCGAATTCGTCGACCTCGAGGGATCCGGGCCCTCTAGATGCGGCCGCATGCATAAGCTT TAGCTTAAGCAGCTGGAGCTCCCTAGGCCCGGGAGATCTACGCCGGCGTACGTATTCGAA IleGluPheValAspLeuGluGlySerGlyProSerArgCysGlyArgMetHisLysLeu -- SP6 promoter GAGTATTCTATAGTGTCACCTAAATCCCAGCTTGATCCGGCTGCTAACAAAGCCCGAAAG CTCATAAGATATCACAGTGGATTTAGGGTCGAACTAGGCCGACGATTGTTTCGGGCTTTC GluTyrSerIleValSerProLysSerGlnLeuAspProAlaAlaAsnLysAlaArgLys Single Cut

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