附“移液器操作”操作考核步骤与操作规范.pdf

“移液器使用和养护”操作考核说明 移液器的考核旨在规范移液器的使用，利用葡萄糖试剂盒（Glucose kit ）检 测血清标准品的吸光值，主要考察移液器的操作规范和加样的准确性。 1 考核标准： 1.1 检测结果（CV 值、R2 值）参考标准：： 1.1.1 CV 值： CV≤3.0 为及格，CV 值越小，表示每次加样越均一、误差越小； 2 2 2 1.1.2 R 值：R ≥0.9960 为及格， R 值越接近 1，3 点稀释越接近同一条直线， 表示稀释越精准。 1.2 、成绩计算 1.2.1．考生考核成绩由酶标仪测定成绩和考生操作成绩两部分组成；酶标仪测定 成绩 （即结果成绩）占60%，；考生操作成绩占40% ； 1.2.2. 考生最终成绩以百分制计算（结果成绩满分为60 分，操作成绩满分为40 分），结果成绩折算方法：结果成绩＝108/CV 值（即CV 值小于 1.8 者，结果成 绩为满分）； 1.2.3 第一次通过，最终成绩不作减分处理；第二次才通过，最终成绩＝60+ （第 二次成绩－60 ）x80% 。 2 材料和试剂的准备： 2.1 100μL、20μL、10ul、2.5μL 四种规格的移液器各1 把。 2.2 200μL、10μL 两种规格的吸头各一盒。 2.3 工作液、标准品、灭菌超纯水（ddH O ）。 2 3 操作步骤： 3.1、吸取适量工作液（不少于2400μL ）。 3.2 、 准备好①标准品原液 ②稀释液A(1/2 原液浓度) ③稀释液B （1/4 原液浓 度）。 稀释液A 和稀释液B 的配制方法如下： 稀释液A ：28μL ＝14μL 标准品原液＋14μL 超纯水 稀释液B ：18μL ＝9μL 稀释液A ＋9μL 超纯水 3.3、将工作液加入酶标板孔中，每孔加100μL，共8 （孔）×3 （排）=24 个孔； 1 3.4 、向装有工作液的3 行8 孔酶标板中分别加入 ①标准品原液 （第一行） ②稀释液A （第二行） ③稀释液B （第三行） 各一行，每孔加入2.0μL （注意：每孔须换枪头）； 3.5、加样完成，将酶标板轻轻摇匀后,放入PE 手套内，并做好标记（姓名）,然 后放入37℃恒温箱内温浴15min。此间考生可以在考核室外等待。待温浴时间到， 取出酶标板至酶标仪检测。 3.6、检测结束，监考人员登记考试结果后，考生离开考场。 附： 1 考试时间安排 1.1 考试时间：考生需按照安排时间提前 10min 至考核室签到，如有事无法进行 考核，应安排替换人，并尽量于前一天邮件通知培训部负责教务的同事，或至少 提前30min 电话通知，如开考尚未签到，视为缺考。 1.2 考试时间为30min （其中操作时间为20min ），从考生进入考场开始计时，考 生必须在规定时间内完成所有实验操作，考试时间结束，考生应立即停止操作， 将装入手套的酶标板放入烘箱，收拾好台面，离开考场。若超出时间在5min 以 内，每分钟扣除1 分，若考生超出5min 以上，则此次考试作不通过处理。 2 考场纪律 2.1 考生应按时进入考场，考核期间保持安静。考试完毕的考生应尽快离开考场， 等温浴时间到时再返回考场取出酶标板进行测试，测试完毕后应迅速离开考场， 不得在考场围观。违反者取消当天考试资格。 2 移液器考核操作规范考点说明 考生考核前，须仔细阅读本考核规范，进入考场时，监考老师不再对考核原 理及流程进行说明。 1 实验准备： 1.1 在进入实验室前，自觉穿上实验服，实验前带好手套，必要时戴上口罩，用酒 精擦拭桌面。 1.2 物品摆放规范：准备所需的物品，以“规范操作，防止污染”为原则——通 常为“左净右脏”，合理摆放。 1.2