第七章蛋白质检验.doc

第八章 血浆蛋白质的测定 第一节 概 述 一、血浆蛋白质的组成及功能 血浆蛋白质是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份90%左右，目前已经研究的血浆蛋白质有300多种，分离出的纯品约100来种，除免疫球蛋白外，主要由肝细胞合成，主要功能1. 维持血浆胶体渗透压；清蛋白。 2. 作为某些物质的载体，起运输作用；如清蛋白能与多种物质结合（FA、胆红素），某些球蛋白具特异地运输某些物质的功能，运铁蛋白、运皮质醇蛋白。 3. 维持体液pH恒定；血浆蛋白pI一般都小于7.4是弱酸，一部分以弱酸盐形式存在，构成缓冲对。 4. 免疫功能；血浆中许多具有免疫功能的球蛋白，主要由浆细胞合成，电泳时位于γ区带，如IgG、IgA、IgM、IgD、IgE，此外，还有具有免疫作用的非特异球蛋白，如补体。 5. 凝血与纤溶作用；凝血与纤溶是一对矛盾的统一、凝血因子与纤溶因子绝大部分是血浆蛋白质，它们促进血液凝固，防止血液流失和溶解血栓，防止重要脏器的动脉栓塞。 6. 营养作用；血浆蛋白质可分解成AA，用于合成组织蛋白或氧化供能。 7. 催化作用；血浆中有许多酶类，其中部分在血浆中发挥作用，称血浆功能性酶，如凝血酶原、纤溶酶原、铜蓝蛋白、LPL、LCAT、肾素等。 二、血浆蛋白质 （一）前白蛋白（prealbumin，PA）分子量，由肝细胞合成，电泳时移动速度较白蛋白快，位于其前方面得名，半寿期短12h。PA是一类运载蛋白，一种能与甲状腺素结合，称为甲状腺结合蛋白，一种能与VitA结合，称为VitA结合蛋白，常用测定方法是免疫学方法，正常参与范围0.2～0.4g /L急性炎症，恶性肿瘤，肝硬化或肾炎时下降。 （二）白蛋白（albumin，Alb）分子量66458，由肝实质细胞合成，半寿期15～19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占40%～60%，主要功能，维持血浆胶体渗透性，缓冲作用，运输作用，营养作用，调节某些激素或药物活性。 白蛋白可微量地通过肾小球，约0.04%，但大部分被血小管重吸收。 白蛋白的测定方法目前主要是溴甲酚绿（BCG）法，正常参考范围35～55g/L，血浆白蛋白增高临床少见，主要见于严重失水引起血液浓缩，血浆白蛋白降低临床常见。①合成障碍急；慢性肝炎。②丢失过多；肾病综合症、慢性肾小球、肾炎、糖尿病、系统性斑狼疮等。③分解过多；营养不良，慢性胃肠道疾病。 （三）α1-酸性糖蛋白（α1-acid glycoprotein，AAG）、分子量约4万，含糖约45%，pI2.7～3.5，主要由肝细胞合成，某些肿瘤组织也可合成。 AAG是主要的急性时相反应蛋白，急性炎症时上升，与免疫防御功能有关。 AAG测定方法，使用AAG抗体，进行免疫扩散法或免疫比浊法检测，正常参考范围0.5～1.5g/L,主要作为急性时相反应的指标，风湿病、恶性肿瘤、心肌梗塞患者上升，营养不良、严重肝病下降。 （四）α1-抗胰蛋白酶（α1-antitrypsin，α1AT或AAT），分子量5.5万，pI4.8，含糖10%～12%，电泳时位于α1区带，占90%左右，由肝细胞合成，能抑制多种酶活性，尤其是蛋白酶，占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右，抑制作用有明显的pH依赖性，在中性和弱碱性中活力最大。 AAT也是一种急性时相反应蛋白，主要功能是对抗多形核白细胞吞噬作用时释放的溶酶体蛋白水解酶。 AAT测定方法，目前主要采用免疫化学法，正常参考范围，新生儿血清1.45～2.7g/L，成人0.78～2.0g/L，AAT下降见于胎儿呼吸窘迫症，AAT缺陷所致的肺气肿、肝硬化等，AAT上升见于急性炎症、外科手术后，长期服用可的松药物，妊娠及服用避孕药物。 （五）甲胎蛋白（α1-fetoprotein，AFP）分子量6.5～7万，pI4.75含糖量4%，主要由胎儿肝合成，妊娠13～15周血清AFP含量最高，以后逐渐下降，出生时仅为高峰期的1%～0.1%，周岁时接近成人水平，仅10～30μg /L，功能不详。 AFP作为肿瘤标志物，对原发性肝Ca的诊断很有价值，80%以上原发性肝Ca患者血清AFP上升，但无特异性，肺Ca、胰腺Ca，肝硬化患者血清AFP亦升高，此外，羊水AFP含量测定可用于胎儿产前监测，AFP↑提示胎儿畸形（神经管缺损、脊柱裂、无脑儿），死胎。 AFP测定方法，火箭电泳放射自显影，放射免疫分析法，灵敏度特异性很高，有放射污染。反向间接血凝法（RPHA），操作简便，定量不够精细，适合于普查、筛选。酶联免疫法（ELISA），灵敏度接近放免，且操作简便，无放射污染，便于推广。 （六）结合珠蛋白（haptoglobin，Hp）又名触珠蛋白，是一种糖蛋白，主要由肝合成，电泳时位于α2区带，是一种急性时相反应蛋白，为两对肽链组成的四聚体（α2β2），