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细菌的分离与鉴定
名词解释
细菌分离及鉴定:使用人工的方法使细菌在适当的环境和营养基质中生长繁殖,获取纯种、进行鉴定与研究等。
培养基:人工配置的供细菌生长繁殖的营养基质,是用人工方法将多种营养物质按照各种细菌的需要而组合成的混合营养料。
选择性培养基:在培养基中加有出营养成分以外的抑制物质,使之具有选择性,有利于目的细菌的检出和识别,而抑制其他非目的菌的生长或使其生长不佳。
鉴别培养基:利用各种细菌分解糖类和蛋白质能力及代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物,观察细菌在其中生长对底物的利用,从而鉴别细菌的培养基。
系统鉴定:通过病原菌的形态结构、生长特性、抗原性和病原性等检测,并用已知标准免疫血清确定分离细菌的属、种和型。
基因探针技术:用标记物标记细菌染色体或质粒DNA上的特异性片段之辈成细菌探针,待检标本经过短时间培养后,经过点膜、裂解变性、预杂交和杂交后,利用探针上标记物发出的信号可以知道杂交结果并判断杂交结果并判断病原体的性质。
7、毒力:病原细菌的致病能力的强弱。通常病原细菌的毒力越大,其致病性越强。
8、半数致死量:在一定的时限内能使半数实验动物感染后发生死亡所需的活的细菌量或毒素量。
9、复杂染色法:应用两种或两种以上的染料或再加媒染剂进行染色的方法称为复杂染色法。
10、抑制剂:用于抑制非检出菌的生长或使其少生长,以利于检出菌的生长。
填空
1、培养基的主要成分有营养物质、水分、凝固物质、抑制剂和指示剂。
2、当琼脂含量为1%-2%时可制成固体培养基,含量为0.3%-0.5%时可制成半固体培养基。
3、常用的抑制剂有胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸盐、四硫磺酸盐、叠氮钠、一些染料及某些抗生素等。
4、常用指示剂有酚红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中性红、甲基红、酸性复红等。
5、鉴别培养基主要供生化反应试验用,如糖发酵培养基、七叶苷培养基等。
6、常用的接种方法有平板划线接种法、斜面接种法、倾注培养法、穿刺接种法、半固体培养基接种法、液体接种法、平板涂布接种法。
7、微生物的生长,除了受本身的遗传特性决定之外,还受到许多外界因素的影响,如营养物浓度、温度、水分、氧气、pH等。
8、大多数细菌所需的培养温度是35至37℃,根据细菌对氧气的需求不同,可将细菌培养分为需氧培养法、二氧化碳培养法、厌氧培养法。
9、在厌氧培养法中,造成厌氧环境的方法有多种,常用的有厌氧罐培养法和气体发生袋法。
10、微生物鉴定的程序通常是根据其形态,生长、生化特性等定种,最后根据抗原的血清学检查定型。
11、菌落特征代表了该细菌的特征,因而观察菌落,描述其特征,并初步识别是极为重要的。
12、细菌菌落的基本特征常从菌落形状、菌落大小、表面性状、边缘情况、颜色、透明度、质地、黏度、乳化性这几个方面来描述。
13、细菌在培养基中一般以18至24小时观察生长特性为好,生长特性包括发育程度、浑浊度、液体表面性状和其他等。
14、细菌的基本形态可分为球状、杆状和螺旋状三种。
15、革兰氏染色法的基本步骤有初染、媒染、脱色、复染吸干或自然干燥,镜检。
三、判断
1、革兰氏染色阳性细菌呈红色,革兰氏阴性细菌呈蓝紫色。(错)
2、常用的抑制剂包括酚红、溴甲酚紫、溴麝香草芬蓝等。(错)
3、ss培养基是选择性培养基的一种。(对)
4、固体培养基分为平面、斜面、高层及高层斜面。(对)
5、接种后在皿底注明日期和标本号,置孵箱中培养,一般在36至40小时后观察结果。(错)
6、利用化学反应产生二氧化碳,常用的方法为NaHCO3-HCL法。(对)7、有些细菌能分解蛋白质中的色氨酸而产生吲哚,后者能与对位二甲基氨苯甲醛作用,形成玫瑰吲哚而呈红色。(对)
8、对接种环进行灭菌时应将镍丝直立于火焰外焰渐渐下移,使之烧红,再平持接种环将金属柄往返在火焰中通过3次灭菌,待冷却后使用。(对)
9、在V-P试验中,培养及表面的下层出现红色者,为阳性。(对)
10、在对细菌基本形态及特殊结构的观察中,只需考虑细胞壁细胞膜细胞质和核质等基本结构即可,不必考虑鞭毛、芽孢等特殊结构。(错)
四、选择
1、下面不是培养基中常用的指示剂的是(A)
煌绿B.酚红C.甲基红D.溴甲酚紫
2、下列属于厌氧培养法的是(D)
二氧化碳孵箱法B.烛缸法C.化学法D.抽气换气法
下列描述中不是用来描述黏度的是(D)
奶油状 B.粘液状 C.膜状易碎 D.膜状
4、常病原菌的毒力越大,其致病性(A)
A.越大 B.越小 C.不变
5、培养基按成分分类可分为(C)
液体、半固体、固体培养基 B.基础培养基、营养培养基、增菌培养基 C.合成培养基、天然培养基
能利用柠檬酸盐的细菌,培养基从(A)
从绿转为蓝色 B.从红转为绿 C.从红转为蓝 D.从绿转为红
溴甲酚紫牛乳试验中,培养基中的酸碱度可由溴甲酚紫
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