人工种子与植脱毒.ppt

第四章人工种子与植物脱毒;Contents;4.1 愈伤组织与人工种子;4.1.1 愈伤组织 Callus;一、基本概念;Wound callus on the stemof an Erythrina tree 刺桐树;基本概念 愈伤组织的诱导 愈伤组织的器官发生方式;二、愈伤组织的诱导;Stage 1. Induction（诱导期）:;※ 诱导期的长短： 由一系列内部（植物的种类、生理状况）和外部（光照、外源激素）因素决定。 例如菊芋的诱导期有时还不需要1天，胡萝卜则要好几天，而菊芋块茎贮藏时间的改变，诱导期也发生改变。从11月到次年4月取菊芋块茎进行培养，则诱导期从22小时逐渐延长到40小时。;故可以从内外因两方面着手，改变诱导期长短 主要外因方面是添加一些生长物质 Steward等(1964)用2, 4-D及其类似的生长调节物质处理处于静止状态的组织，看到RNA的含量很快明显地增加。并且2、4-D积累在分裂细胞的核仁中。 Yeoman 和 Mitchell (1970) 指出了核仁是生长物质的作用部位。; Brown（1972）认为静止细胞是具有分裂能力的，只是被存在的一类抑制物质所阻止，而使其分裂能力不能表现，如果除去抑制物质，就可恢复分裂能力。若加入抵消抑制物质影响的外源物质（激素），细胞就立即进行DNA复制，全部细胞进入S期，并发生同步分裂。;Stage 2. Cell division 分裂期;分裂期：外植体中已分化的活细胞在外源激素的作用下，外植体外层细胞出现了分裂，由于外层细胞的迅速分裂使得这些细胞的体积缩小，逐渐回复到分生组织状态，因此也称为回复变化。在回复变化时，细胞通过脱分化的起动期而进入分裂，并开始形成愈伤组织。 特征：生理生化上分裂期的一个明显特征是外层细胞进行分裂，而中间的细胞不分裂。另外还有细胞数目增加，体积变小；细胞核和核仁增到最大等;形成的愈伤组织的特征：细胞分裂快，结构疏散，缺少有组织的结构，颜色浅而透明;Stage 3. Differentiation 分化期;分化期特点：分化结构的形成过程加速，超过了回复变化。外层细胞的分裂逐渐减慢，甚至停止，为次生生长所代替，大量次生结构出现。在这时期中细胞的伸展和分裂处于平衡，故细胞的平均大小往往没有变化。;Callus types ;Callus may have a yellow, white, green or red (anthocyanin 花青苷) appearance. ;基本概念 愈伤组织的诱导 愈伤组织的器官发生方式;三、愈伤组织的器官发生方式;1、愈伤组织通过不定芽方式再分化形成再生植株的方式主要有三种： （1） 先产生芽，后在茎的基部长根； （2）先长根，再长芽； （3）愈伤组织的不同部位分别形成根和芽。 ;◆ 器官分化的植物激素控制理论： 大多数植物组织或器官的再生作用符合器官分化的植物激素控制理论。 生长素与细胞分裂素 ●比例小时则产生芽 ●比例大时则生根 ●比例适中时，则产生无结构的愈伤组织。;胀闽整直葬雾僵犯吠檬伞歼嫌舶然相较旋棘评镶寸窑喇岔巨抢摈额雌与戚人工种子与植脱毒Cell Engineering;2、体细胞胚的发生 愈伤组织 体细胞胚 植株;三、愈伤组织的器官发生方式;一般愈伤组织开始分化时，由大小不等的细胞开始逐渐形成大小均匀的细胞，保持相对稳定状态。 在分化时，愈伤组织的表层和内部都可形成分生中心。芽多发生在愈伤组织的表层，属外起源。 根发生在组织的深处，与整体植株发生类似，是内起源。 愈伤组织的外部形态也随分化而改变，一般由疏松转向紧密。;4.1 人工种子 Artificial Seed;一、人工种子概述;●种子的结构●;;;2、现代人工种子的概念;2、现代人工种子的概念;根据繁殖体的类型分三类;福嘻貉曰祁渴疹耽菠汞螺娃敞赫俏荧喳诽铬奠控密筋匙慑亚谣恼猾页郝泰人工种子与植脱毒Cell Engineering;B、微型营养器官繁殖体培养;愉足栏最贴轧侦起涪皇望扦执摆鳃枚闹胖蛇握壤倚帐欧催瓮棱给爹未鼓鸿人工种子与植脱毒Cell Engineering;C、微芽繁殖体培养;4.1 人工种子 Artificial Seed;二、人工种子的制备;;;;二、人工种子的制备;;;;用褐藻酸钙水溶性胶囊包埋胚状体， 图褐藻酸钙水凝胶法示意图 包囊体在水中洗 用以生产人工单胚种子称水凝胶法;镶匝棘肛篱抛菊钨寞登绑庸创镍百转伟荒燕恢持婪桐耗布篓绷击羞开然穷人工种子与植脱毒Cell Engineering;制作人工种子的示意图;4.1 人工种子 Artificial Seed;三、人工种子的应用;存在的问题;5.人工种子应用举例;一品红人工种子制作;;2，4-D/6-B