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课题1 菊花的组织培养 学案 学习目标 1.说明植物组织培养的基本原理和细胞分化。 2.学习植物组织培养的基本技术。 3.进行菊花或其他植物的组织培养。 学习重点与难点 重点：1.植物组织培养的相关概念和过程 2.影响植物组织培养的因素 难点：1.影响植物组织培养的因素。 一.植物组织培养的相关概念和基本过程 1、植物组织培养的相关概念 【自主学习】 （1）植物组织培养：在 条件下，将 植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的 上，给予 条件，诱导其产生 ，最终形成 。 （2）细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在__________、__________和_________上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因__________的结果。 （3）细胞的全能性：__________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。 （4）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞 ，是一种__________的呈无定形状态的__________。 （5）脱分化：由_________的植物组织或细胞产生________的过程，称为脱分化，又叫去分化。 （6）再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成__________，这个过程叫做再分化。 【问题探究】 问题:1：分化的细胞体现全能性的原因？ 问题2：请大家依据概念找出体现全能性的前提条件？ 问题3：思考 细胞分化是否意味着细胞中遗传物质的改变？ 植物组织培养的基本过程 【自主学习】 （1）过程示意图 移植 ——→试管苗———→完整的植物体 【问题探究】 问题4：思考脱分化、再分化过程进行的细胞变化是？细胞分化后形成的愈伤组织的全能性有何变化？ 问题5：该过程成功的关键步骤有哪些？ （2）脱分化和再分化的比较 比较内容 脱分化 再分化 细胞变化 ? ? 过程 ? ? 形成体特点 ? ? 需要条件 ? ? 二.影响植物组织培养的因素 【自主学习】 1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。同种植物材料，_________ ，_________等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择_________的茎上部新萌生的侧枝。 2.外部因素：（1）营养条件 常用的是__________ 培养基，其主要成分包括： __________，如__________________________；__________ ，如_______________________ ；__________ 等 （2）植物激素 植物激素中__________ 和__________ 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。_________________、______________ 以及__________等，都会影响实验结果。 （3）环境因素 _________ 、_________ 、 _________等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养，一般PH控制在 _______ ；温度控制在 ________ ；每天用日光灯照射___小时。 【问题探究】 问题6：MS培养基中，各种营养成分各有什么作用？与微生物培养基的配方相比，有什么不同? 问题7、植物为自养生物，为什么在培养的过程中需要加入糖类等有机物？ 问题8：生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响？ 问题9：总结植物组织培养的条件？ 三.实验操作过程 1.制备MS固体培养基 实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备 （1）配制各种母液。 配制母液时，大量元素浓缩__________ ，微量元素浓缩__________ 。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。 （2）配制培养基。 配制1LMS培养基时，将称量好的琼脂加入800mL ，加热熔化，然后加入 ,取配置好母液，依次加入，定容至1000mL。__________，然后分装到锥形瓶中，每瓶分装__________。 由于菊花茎段的组织培养比较容易，因此不必添加 。 （3）灭菌。分装好的培养基连同其他机械一起进行 。 2.外植体消毒 选取菊花茎段时，要取 _