日本血吸虫实验课件.pptVIP

日本血吸虫尾蚴 大小：280 ～ 360×60 ～ 95 ?m 体部：100～150 ?m 头器： 前钻腺：2对 后钻腺：3对 尾部：尾干, 尾叉 尾 蚴 中间宿主：钉螺； 终宿主：人； 感染阶段：尾蚴； 感染方式：经皮肤； 体内移行：皮下静脉→右心→肺→左心→体循环→ 肠系膜动脉→毛细血管→肠系膜静脉→门静脉→肠系膜静脉； 寄生部位：门静脉、肠系膜静脉。 日本血吸虫生活史要点 在血吸虫感染过程中，尾蚴、童虫、成虫和虫卵均可对宿主造成损害，损害的主要原因是血吸虫不同虫期释放的抗原均能诱发宿主一系列免疫病理变化。 日本血吸虫的致病性 日本血吸虫的致病性 幼虫的致病作用： 尾蚴性皮炎、尾蚴性肺炎 童虫、成虫的致病作用： 静脉内膜炎、静脉周围炎 日本血吸虫成虫的致病性 成虫寄生于血管内，利用口、腹吸盘的交替吸附血管壁而作短距离移动，因而可引起静脉内膜炎。成虫的代谢产物，分泌、排泄物和更新脱落的表膜，在宿主体内可形成免疫复合物，引起免疫复合物型（III型）超敏反应。 日本血吸虫成虫的致病性 日本血吸虫成虫虫卵的致病性 在组织中沉积的虫卵发育成熟后，卵内毛蚴释放的可溶性虫卵抗原经卵壳上的微孔渗到宿主组织中，引起淋巴细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及浆细胞趋向、集聚于虫卵周围，形成虫卵肉芽肿（Ⅳ型超敏反应）。沉积在宿主肝、肠组织中的肉芽肿可不断破坏肝、肠的组织结构，引起慢性血吸虫病，虫卵是血吸虫病的主要致病因子。 肝脏虫卵肉芽肿(虫卵结节) 日本血吸虫成虫虫卵的致病性 日本血吸虫成虫虫卵的致病性 在肝脏，日本血吸虫虫卵肉芽肿位于门脉分支的终端，重度感染时门脉周围出现广泛的纤维化，阻塞窦前静脉，导致门脉高压，引起肝、脾肿大，腹壁、食道及胃底静脉曲张，上消化道出血及腹水等症状，此为肝脾型血吸虫病。 日本血吸虫成虫虫卵的致病性 虫卵肉芽肿 （病理切片） 虫卵肉芽肿 （病理切片） 日本血吸虫成虫的中间宿主 环卵沉淀试验（COPT） 环卵沉淀试验是检测血吸虫病的免疫学试验。当血吸虫成熟虫卵与患者血清一起孵育，虫卵内毛蚴分泌的抗原物质透过卵壳，与血清中特异性抗体结合，在虫卵周围形成镜下可见的沉淀物，即为阳性反应。 环卵沉淀试验（circumoval precipitin test) COPT 一种体外抗原－抗体反应 抗原：血吸虫成熟虫卵内毛蚴分泌物 抗体：患者血清中特异性抗体 常规法： 用载玻片或凹玻片进行，加样本血清后，挑取适量鲜卵或干卵(100～150个，从感染动物肝脏分离)，覆盖24×24mm盖片，四周用石蜡密封，置37℃恒温中48小时后，低倍镜观察结果，必要时需观察72小时后的反应结果。 典型的阳性反应为泡状、指状、片状或细长卷曲状的的折光性沉淀物，边缘整齐，与卵壳牢固粘连。 分级强度判读： “+”：为卵周出现泡状、指状沉淀物的面积小于卵周面积的的1/4，片状沉淀物小于1/2，细长曲带状沉淀物不足卵的长径。 “++”：为泡状、指状淀物总面积大于卵周积1/4，片状沉淀物大于1/2，曲带状沉淀物相当于或超过卵的长径。 “+++”：为泡状、指状沉淀物大于周积的1/2，片状物面积等于或超过卵的大小，曲带状沉状物超过卵长径数倍。环沉率：（阳性反应虫卵数/全片观察成熟虫卵数）×100% 环卵沉淀试验（circumoval precipitin test) COPT 血吸虫干卵抗原片(或膜片)环卵沉淀试验 近年来研制的一种改良方法，利用环卵抗原活性物质的耐热特性，将分离的纯卵经超声和热处理，定量滴加、烤干固定载玻片或预制的聚乙烯薄膜片。此种干卵膜片，保存时间较长(4℃半年)，已商品化。 试验时只需加入血清试样，湿盒内孵育，判读结果与常规法相同。干卵膜片法还具有简化操作规程，提高卵抗原的规范要求，并可长期保存等优点。 实验操作 日本血吸虫病鼠解剖 （1）观察日本血吸虫成虫的寄生部位 （2）取活成虫镜下观察 （3）取病鼠肝脏压片，观察肝虫卵结节 解剖日本血吸虫病鼠：取人工感染日本血吸虫尾蚴6周后的小白鼠一只，仰卧固定，用颈椎拉脱法致死，然后剖开腹腔，暴露肠系膜静脉和肝脏，肉眼观察肠系膜静脉中寄生的成虫以及肝脏表面的虫卵结节。 实验操作：日本血吸虫病鼠解剖 解剖日本血吸虫病鼠：取血吸虫病鼠肝脏绿豆粒大小一块，置于两张载破片之间压紧，低倍镜下观察结节中的虫卵。可见到发育期不同的虫卵成簇分布于结节中。 实验操作：日本血吸虫病鼠解剖 实验操作：日本血吸虫病鼠解剖 作业：绘图 1. 日本血吸虫卵 实验操作报告 武汉大学基础医学院 蒋洪博士 1