实验六、培养基的制备及常用器皿的准备幻灯片.pptVIP

2004.6 实验六 培养基的制备及常用器皿的准备 河南工业大学微生物学实验室 实验所需物品 综合性实验每排5人一组，每组请备齐下列物品： 1、洗干净的培养皿10个。 2、洗干净的试管10个。 3、洗干净的无塞三角瓶2个，具塞三角瓶2个。 4、培养皿桶1个。 5、1-2ml刻度吸管3支。 6、洗耳球1个、玻璃棒1支。 7、搪瓷量杯1个。 8、量筒1个。 纱布、棉花、棉绳、培养基、天平等在最后一排实验台 1、学会培养基的制备和常用器皿的准备方法。 2、学会高压蒸汽灭菌及干热灭菌方法。 一、实验目的及要求 二、实 验 原理 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。 培养基的种类很多，使用的原料也各有差异。但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所需的C源、N源、无机盐、生长因子以及水等。另外，培养基中一般含有适宜的pH值，一定的氧化还原电位及合适的渗透压。 任何一种培养基制成后应及时的灭菌，以备培养菌使用，一般培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌。 三、实 验 器 材 1、培养基：营养琼脂培养基、改良查氏培养基。 2、器皿：移液管、培养皿、试管、三角瓶、搪瓷缸、量筒等。 3、仪器：高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱。 4、其他：报纸、纱布、棉花、棉线绳。 四、实验方法和步骤 1、营养琼脂培养基的配制 称量1.0克可溶性淀粉。加少量水加热溶化，然后加入4.5克营养琼脂，加水至100毫升，煮沸后倒入无塞三角瓶中，加棉塞报纸包扎后用高压蒸汽灭菌器灭菌。 四、实验方法和步骤 2、改良查氏培养基 NaNO3 2g K2HPO4 1g KCl 0.5g MgSO4 0.5g FeSO4 0.01g NaCl 60g 蔗糖 30g 琼脂 20g 水 1000ml 煮沸后倒入无塞三角瓶中，加棉塞灭菌。 建议每班集中配1000ml，然后均分到各组。 四、实验方法和步骤 2、无菌水的制备（稀释用） 取9ml蒸馏水于试管（18×180mm）中，塞棉塞，报纸包扎后湿热灭菌。 取90ml蒸馏水于具塞三角瓶中。 手提小型高压蒸汽灭菌 立式高压蒸汽灭菌 四、实验方法和步骤 四、实验方法和步骤 4、常用器皿准备（干热灭菌） a. 刻度吸管的包装 b. 培养皿的包装 电热鼓风干燥箱（干热灭菌用） 1、高压蒸汽灭菌和干热灭菌各适用于哪些物品？ 2、两种灭菌技术应注意哪些关键操作？3、培养皿等干热灭菌前包扎的目的？ 五、 作 业 题