实验操作基本规范-转.docVIP

实验一 实验操作基本规范 行为规范 各人自用的药品各人负责，未经本人许可，别人不可外借。 公用药品由指定人员负责。未经负责人许可，不可外借, 外借药品应该以分装形式分发。 操作基础 取液不可直接把枪探入试剂瓶。应从试剂瓶倒少许入烧杯等容器再取样 新进的蛋白酶等公用的试剂要分装保存。 实验应该考虑空白和对照的，空白没做好前不能做样品。 能用天平和密度表换算的情况下，尽量用天平而不是容积型的量器 本实验注意事项 超净工作台的使用：A键――开关电源，同时开启紫外灯（使用前开启紫外灯半个小时，工作时应把该灯关闭） B、C键―调节风力大小 D键关闭紫外灯 使用超净台时，应注意观察紫外灯是否已经关闭！！ 摇床和恒温培养箱可放置过夜使用，但鼓风干燥箱在离开实验室应该关闭其电源。干燥箱的设置温度不可超过70度。（已经设置好，无须再调整干燥箱温度） 可调电炉，切勿将电线接触炉壁，小心使用电炉，不可将附近的窗帘等易燃物点燃。 电泳边的试剂有毒，使用时小心。 三层架的第一层放置干净的器皿，第三层放置药品――这些药品十分昂贵，使用时切勿浪费。 PE手套用于做有毒实验，乳胶手套（较贵）用于做含有腐蚀性药品的实验。 移液枪的使用：抽屉里有数把无盒装的移液枪可使用，另两把装于盒中仅能用于PCR实验，桌上的5把移液枪用于做分子生物学实验，不可随便使用。对于挥发性试剂应用特定的移液枪。 洗涤器皿：先把器皿用肥皂水浸泡过夜，再用清水洗涤两次，最后再用蒸馏水洗一遍，最后用干燥箱干燥。 电子天平：称量较贵的药品时，应注意少量多次称量，避免浪费。若称量过量时不可将药品重新放回药盒中，以免污染药品。药勺不可交叉使用，使用完后用水冲洗干净，然后用纸擦干净。称量有毒药品的用具应经过特殊处理。 电冰箱：电冰箱里面有强腐蚀性药品和一些贵重试剂，切勿将其电源关闭。开关冰箱门应轻缓。 水槽：在水槽中倒入有毒废弃液后，应用大量水冲洗。 垃圾：垃圾应该分类放置，一个用于放置有毒药品，一个放置废弃培养基，一个用于放置生活垃圾。 药品的标注：配制药品本人应该在药品上贴上标签，写上配制者姓名、配置时间、试剂名称。 开水：烧完开水应该把开水放置于对面没有实验的桌子上。避免饮用水污染，保证试验人员的身体健康。 最后离开实验室的人应该检查实验室的窗户，电源，水源有无关好，切记关掉干燥箱电源。 微波炉不可放入任何金属物品。只能用于玻璃或者塑料。 做完实验，应清理台面，尤其要处理掉有毒物品，避免给他人造成损害。 注意试验室的告示和各种说明。 灭过菌的器皿不可随意打开，避免污染。 注意安全，对于任何不了解的药品或者仪器设备，不可触碰，避免给自己或者试验室造成损失。 分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作 【实验目的】 （1）了解实验的常规仪器、设备、耗材。 （2）掌握本实验所用仪器的功能和使用方法。 【实验内容】 一、验室的常规仪器、设备 (一) 温度控制系统： 1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。 4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。 -20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。 -80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。 0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。 2．液氮罐：有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速冻和长期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（-196℃）具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。 3．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。 CO2培养箱适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2（通常5%），用来维持培养液的酸度（pH值）。 37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。 4. 水浴锅：用于保温。 25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。 25-100℃水浴箱用于常规试验。 5. 烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。 （二）水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高。 1. 蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。双蒸水、三蒸水配液，许多实验要去离子水。 多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质，不能完全除去水中溶解的气体杂质（Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ)）。 2. 离子交换器：去离子水—用离子交换法制取的水，称去离子水。 去离子效果好，但不能除去水中的非离子型杂质，其中常含有微量的有机物（树脂等）。 3．超纯水