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植物病理实验基本仪器设备及其使用
植物病理实验室基本仪器设备及其使用
植物病理实验室常需要进行病原菌的分离、纯化、接种和显微观察等,所需的基本仪器设备,除了本书各有关章节已专门介绍的以外,尚有一些常用的仪器设备。
一、玻璃器皿使用及洗涤
(一)常用玻璃器皿的种类及用途 1.培养皿 倒人适量的固体培养基制成平板,可用于病原菌的分离培养、纯化、鉴定、菌落形态观察等。是病理实验室中需用量最多的玻璃器皿之一。一般所用的规格为直径9cm,高1.5cm。质量,要求皿底要平,明亮无杂色,能耐高温、高压。 2.试管 用于分离培养保存菌种,也是病理实验室中需用量最多的器皿之一。一般所用规格以1.6cmxl3.6em为宜。试管口以无翻卷的或光滑的为好。 3.三角瓶 主要用于盛装培养基和灭菌水,需用量也较多。所用规格主要为250ml,其次为200ml及50ml。 4.玻璃棒和玻璃管 玻璃棒用于配置溶液时的混匀搅拌。一般使用直径0.5cm左右的玻棒较多,根据需要可配备长短不等的玻棒多个。玻璃棒和玻璃管还可烧制各种玻璃小用具。 5.滴瓶 主要用于盛装各种试剂及染液。其规格以60ml容量为宜。有无色透明的和棕色的。棕色滴瓶用于盛放应避光的试剂。 6.吸管 用于吸取各种溶液或菌液。其规格有0.5ml、1ml、2ml、5ml、lOml等,应各具备一定数量。有单刻度的移液管和多刻度吸管。使用时,对于lml以下的吸管都必须将尖端遗留的液体吹人配制溶液的容器中。lml以上(包括lml)的不应吹出尖端遗留的液体,当液体不再流出时,应使该管尖端紧靠容器内壁一段时间。 7.烧杯 用于各种溶液的配置。100--600ml不同规格的应各具备一定数量。另外,也应有少量的作为分离材料表面消毒用的lOml烧杯。 8.载玻片 用于病原菌的显微检查、临时性或永久性制片。有两种,一种为普通载玻片,是平的;另一种为凹载玻片,其上有一个或两个凹窝。普通载玻片以薄而无色的较好,厚而发绿的质量较差。普通载玻片大小为7.5cm×2.5cm×0.1cm。 9.盖玻片 用于显微检查,或用于临时性或永久性制片。薄而透明为好,其上有白色云斑的多为劣质品,对显微观察妨碍极大。规格通常为18mm×18mm,过大时易使浮载剂流失在显微镜载物台上。 10.双层瓶 由外层较大的瓶和内层较小的瓶组成。外层盛放二甲苯,内层盛放香柏油。 11.树胶瓶 用于盛放封片用树胶,一般为茶色。 12.玻环 为高1cm,内径lcm的磨口玻璃环,作真菌孢子萌发用。 13.蒸馏水瓶 用于盛放实验用蒸馏水。有5000ml、10ml等不同规格。在顶盖上有一小的进气孔,接近瓶底处有一出水口,可与橡胶管相连。 14.干燥器 可用于盛放需要干燥的样品或仪器部件(如显微镜镜头等)。干燥器的下部盛放干燥剂。常用干燥剂有硅胶和无水氯化钙等。 15.量筒 10ml、100ml、500ml、1 000ml等各种规格的都应具备一定数量。量筒为粗量器,不需矫正,可粗略度量液体体积。使用时应根据所量溶液的多少来选择合适的规格,不可使用过大的量筒量取较小的体积。如用100ml或500ml量筒量取5ml或10ml溶液,显然误差太大。读数时,视线必须和溶液凹面成一水平,不可过高或过低。 16.微量吸管(micropipette) 微量吸管又称微量加样器。主要用来吸取微量液体,规格型号很多。每个微量吸管在一定范围内可调节体积,并都标有使用范围。例如,0.5~10μl、2~10μl、10~100μl、100~1 000μl、5000μl等。使用方法:将合适大小的塑料嘴(tip)牢固地套在微量吸管的下端,旋动调节键,使数字显示器上显示出所需要吸取的体积,用大姆指按下调节键,并将吸嘴插入液体中;缓慢放松调节键,使液体进入吸嘴,并将其移至接收试管中;按下调节键,使液体进入接收管;按下排除键,以去掉用过的空吸嘴或直接用手取下吸嘴。 微量加样器分为可灭菌式和不可灭菌式。进行无菌操作时,如果使用的是不可灭菌式微量加样器,则要尽量使用带有过滤棉纱的吸嘴。 17.小塑料离心管 又称Eppendorf管。有1.5ml和0.5ml两种型号。主要用于小量菌体的离心、核酸提取、PCR反应等。 18.容量瓶 有50ml、100ml、250ml、500ml、1 000ml等规格。用于配置一定体积的溶液。在瓶颈上有一刻度,加入溶液到此刻度时,就相当于瓶上所标明温度(通常为20C)时的体积。使用量瓶时,不要将溶质直接倒人量瓶然后加水至刻度,而应使溶质首先在小烧杯中加水溶解,再将溶液沿玻棒到人量瓶。在量瓶内,可事先加水至体积223或1/2。盖上磨口瓶塞子后,用食指或掌心顶住瓶塞,倒置量瓶,不时摇动和翻转量瓶,以使溶液充分混匀,然后加水至刻度。 1
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