基因突变和基因组-培训课件.ppt

转基因动物实验研究方向 1、培育抗逆、优质的动物新品种 如：超级小鼠、抗冻鱼、高瘦肉率猪、高产奶牛等 1981年，美国的Brinster和Palmiter用小鼠进行了转基因实验 特大鼠生长激素基因与小鼠的金属硫蛋白的基因(MT)连在一起，构成MTrGH基因 然后用显微注射法注射到小鼠受精卵中 再移植入假孕鼠的子宫中，发育生长 共产出21只小鼠 其中7只带外源基因，而6只体型较原小鼠大一倍左右 即著名的转基因超级小鼠 2、培育生产药用蛋白或医学研究模型的转基因动物 就基因药物而言，最理想的的基因表达场所是乳腺，从乳汁中提取的目的基因产物不但产量高且生物活性稳定 携带人血清白蛋白基因的转基因试管牛“滔滔” 转基因的安全性 如果把一些害虫赶尽杀绝，田里都是“刀枪不入”的“铁杆庄稼”是否一定就是好事？ 人类成千上万年已吃惯了原有配比的食物，现在为了抗虫或抗病的目的，把某种细菌的一种对人类十分陌生的蛋白质放到作物中去，人类吃后，固然无明显毒性，长远来讲是否会对人类有伤害？ 知情权 1、通常PCR反应需要（ ）个引物 A、1 B、2 C、3 D、4 2、PCR反应（ ） A、由变性、退火、延伸三步循环 B、发明人是Mullis C、所用DNA聚合酶具有很好的耐热性 D、上述各项 3、能够自我复制的小型环状DNA是（ ） A、转座子 B、移码子 C、顺反子 D、质粒 4、和cDNA相比，DNA序列中多出的基因间序列被称为（） A、操纵子DNA B、调控子DNA C、外显子DNA D、内含子DNA 5、下列哪个过程不可以将原癌基因转变为癌基因（ ） A染色体易位 B基因转座 C基因扩增 D甲基化修饰 6、下列（ ）可以用于制备重组DNA A质粒 B两个不同来源的DNA C限制性核酸内切酶 D上述都是 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 1、B 2、D 3、D * 5、D 6、D 1990年正式启动，预计15年时间，投资30亿美元。 美、英、法、德、日、中六国，我国是唯一的发展中国家，完成1%的测序工作（3号染色体3千万个碱基对） 2000年6月公布草图，2003年完成。 基因组（genome）： 一个生物体的全部基因序列 最简单的生物如SV40病毒的基因组仅含有5100碱基对（base pair bp） 大肠杆菌基因组的大小为5700千碱基对（kbp） 人的基因组则由大约3.0×109个bp组成 在人类基因组中，外显子仅占1.5%，内含子和调节序列占25%；基因间DNA间隔占74.5%，其中Alu序列就占10% 人类共有2.5万个基因或更少（原先估计5～10万） 是原核生物平均基因数的5～15倍 人平均基因长度27000bp，而原核生物基因约1000bp 10.4 DNA操作技术 DNA操作技术是当今分子生物学研究的核心技术 基因工程技术是DNA操作技术的一部分 基因工程 采用类似工程技术的方法，在离体条件下将特定的基因或DNA序列插入载体中，构成重组DNA，再把它导入特定的生物细胞中，使外源基因在其中复制表达，制造出大量基因和基因产物，并改变受体生物的性状。 过程 1、目的基因的获得及制取：限制性内切酶 2 、基因载体的选取：质粒、噬菌体 3 、DNA体外重组：连接酶 4 、DNA重组体导入受体细胞： 大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌 5、重组体的筛选 6、重组基因的表达 基因工程的内容 基因克隆示意图 10.4.1 目的基因的获得及制取 1 目的基因获得 化学合成法 基因组DNA文库 cDNA文库 聚合酶链式反应PCR 基因组DNA文库 利用分子克隆的方法，可以把某物种的全部DNA切割成大小合适的片段，并重组到合适的载体中，在合适的受体细胞中扩增，于是人们就可以方便的保存该物种的全部DNA 称为该物种的基因组文库 cDNA文库 如果把某组织或细胞中全部的mRNA变成DNA，再克隆到合适的载体上，就得到cDNA文库。 它涵盖了该组织或细胞中表达的全部基因的编码序列 DNA多聚链式反应 1985年由美国Millus创立 PCR 基因的 扩增技术——链式扩增反应 5′ 3′ 3′ 5′ 5′ 3′ 3′ 5′ + 变性(94℃) 复性(55℃) 5′ 3′ P1 3′ 5′ + P2 + P1 P2 合