李若瑜药敏试验-培训课件.ppt

Fluconazole不敏感念珠菌对Voriconazole的药敏数据 Pfaller MA, JCM, 2010,48(4): 1366–1377 唑类交叉耐药比例升高 全球念珠菌监测体外药敏数据(1997-2007) 荷兰伊曲康唑耐药菌比例有所上升 Year % R N Snelders et al. PLoS Medicine. 2008;5:e219. L98H (TR) was the dominant resistance mechanism Isolates genetically distinct but clustered. 曲霉临床菌株的分离鉴定 来源：北大医院皮科真菌室受检标本 时间：2008年7月到2011年11月 鉴定：所有菌株均经标准的曲霉鉴定方法进行鉴定，即在麦芽琼脂和查氏琼脂平皿25度培养7天后，经形态学鉴定（据齐祖同主编《中国真菌志-第5卷：曲霉属及其相关有性型》，科学出版社，1997年） 菌种分布：烟曲霉130株，黄曲霉58株，土曲霉16株，其它9株 药物敏感性测定及结果 测定方法：CLSI M38-A方案和E-试验 结果 1株烟曲霉对ITC耐药而对VRC敏感 1株烟曲霉对ITC和VRC均耐药 1株黄曲霉对VRC耐药而对ITC敏感 内 容 药敏试验的常用方法及应用 抗真菌药物的耐药监测现状 抗真菌药物的耐药机制研究近况 什么情况下容易发生耐药? P.Verweij, TIMM, 2007 常见耐药菌及其类型 真菌 AmB 5-FC 唑类 棘白菌素 C. glabrata 获得性 — 获得性 — C.krusei 获得性 天然 天然 — C.lusitaniae 天然/获得性 — — — Cryptococcus neoformans — — — 天然 Aspergillus terreus 天然 — — — Scedosporium apiospermum 天然 — — — Scedosporium prolificans 天然 — — — Trichosporon beigelii 天然 — — — ERG11基因突变 ERG11基因过表达 ERG3、ERG5基因突变 药物泵基因过表达 念珠菌唑类药物耐药机制 Clin Microbiol Rev 1998; 11: 382 烟曲霉菌耐药机制 Chamilos G, Kontoyiannis DP., Drug Resistance Updates 8 (2005) 344–358 AF1，2001年12月，第一次就诊； AF2，2002年6月，ICZ 200mg/d治疗6个月后； AF3，2002年8月，停药2个月以后； ICZ静脉给药，200mg bid治疗两周，然后口服，200mg/d继续治疗，其间分离到以下三株： AF4，2002年12月； AF5，2003年1月； AF6，2003年2月； 烟曲霉唑类药物耐药系列分离株 Chen Li,et al. JAC, 2005. MIC of itraconazole against 6 isolates Isolate MIC (mg/L) AF1 0.25 AF2 16 AF3 0.5 AF4 16 AF5 16 AF6 16 AF2的CYP51A第220位蛋氨酸被异亮氨酸替代(M220I) AF4-6的CYP51A第54位的甘氨酸被精氨酸替代(G54R) 药物流出泵及唑类药物靶酶基因相对表达水平 Mann P. A, et al .Antimicrob. Agents Chemother, 2003,47: 577-581. Diaz-Guerra T. M,et al. Antimicrob. Agents Chemother, 2003,47: 1120-1124 Nascimento A. M,et al. Antimicrob. Agents Chemother, 2003,47: 1719-1726 Mellado E. et al. Antimicrob. Agents Chemother, 2004,48: 2747-2750 烟曲霉菌 cyp51A 基因突变的报道 有关三唑类耐药的氨基酸替换 氨基酸改变 耐药药物 M220I, M220V, M220K, M220T 伊曲康唑 G54R, G54E, G54K, G54V 伊曲康唑和泊沙康唑 L98H﹡ 伊曲康唑、泊沙康唑、伏立康唑和立福康唑 ﹡许多三唑类耐药是因为在 CYP51A 基因启动子 L89H 与2个拷贝的34 bp片段串联相结合。 药物主动外排泵的变化 基因标志 蛋白 参考文献 AfuMDR1 ATP-结合盒超家族 Tobin, M.