TB-体内诊断试剂演讲文稿-培训课件.pptVIP

结核菌素试验（也称为芒图试验、PPD试验）是一种诊断结核的工具。它是世界上两个主要结核菌素皮肤试验之一。 一、原理简介 结核菌素试验，是基于Ⅳ型变态 反应原理的一种皮肤试验，是迟 发型细胞超敏反应，用来检测机 体有无感染过结核杆菌。 凡感染过结核杆菌的机体，会产生 相应的致敏淋巴细胞，具有对结核 杆菌的识别能力。当再次遇到少量 的结核杆菌或结核菌素时，致敏 T淋巴细胞受相同抗原再次刺激会 引起变态反应性炎症，释放出多种可溶性淋巴因子，导致血管通透性增加，巨噬细胞在局部集聚，导致浸润。约在48～72小时内，局部出现红肿硬节的阳性反应。若受试者未感染过结核杆菌，则注射局部无变态反应发生。 二、历史 1890年罗伯特·科赫首先公布发现结核菌素。该年4月4日柯赫在第10届世界医学会上表示，发现一种可以预防豚鼠结核病，并有治疗作用的物质。 1891年柯赫明确这种物质是结核菌的培养滤液，并命名为结核菌素（OT）。 1908年芒图(C.Mantoux)发现结核菌素试验方法，也称为芒图试验、PPD试验。 1928年美国塞伯尔（P.B.Seibert）从结核菌培养液中制成了一种纯蛋白衍生物结核菌素(PPD)。 1939年，原苏联的M·A·林尼科娃创建了一种修改版的PPD，PPD-L。在1954年，原苏联开始批量生产PPD-L。 1941年美国研制成功一种标准纯蛋白衍生物结核菌素(PPD-S)。 1958年丹麦研制成了更纯、更浓的纯蛋白衍生物结核菌素(PPD-RT23)，为WHO推荐制剂。（50年代中期，UNICEF（联合国国际儿童基金会）委托丹麦血清研究所生产一大批PPD-RT23,共有650.5g，其中500g约330亿人份供各国使用至今。） 三、常用种类 结核菌素是结核杆菌的菌体成分，有两种： 1、旧结核菌素（old tuberculin，OT）是罗伯特·柯赫（R.Koch）首先发明的。是从生长过结核分枝杆菌的甘油肉汤培养基中提炼出来的结核菌代谢产物，经过灭菌、浓缩形成原液，使用时再稀释成一定倍数（通常是2000倍），使每0.1ml含1U。 主要成分有：（1）结核分枝杆菌蛋白；（2）菌体自溶成分；（3）菌体代谢产物；（4）培养基成分。 三、常用种类 2、结核菌素纯蛋白衍生物（purified protein derivative，PPD）则是由塞伯尔（Seibert）首先制备。PPD菌素是一种由结核菌培养滤液制成、只含结核菌蛋白、不含结核菌体的生物制品。 结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）更为精纯，为纯结素，不产生非特异性反应。其制作过程：菌株→培养→灭菌、滤过→浓缩→盐析、脱盐→干燥、保存→分装。 PPD-RT23是由丹麦制造供应世界许多国家使用，已经取代OT。我国从人型结核菌制成PPD（PPD-C；BT-PPD），又从卡介苗制成BCG-PPD。 四、试验目的 （1）为接种卡介苗提供依据，如结核菌素试验阳性时，表明体内已感染过结核菌，无需再接种卡介苗。阴性者是卡介苗的接种对象。 （2）为测定免疫效果提供依据：一般在接种卡介苗3个月以后，应做结核菌素试验，了解机体对卡介苗是否产生免疫力。假如结核菌素阳性，表示卡介苗接种成功，反之需重新再进行卡介苗接种。 （3）用于诊断与鉴别诊断：结核菌素试验对青少年、儿童及老年人的结核病的诊断和鉴别有重要作用，是普遍运用的辅助检查手段，是测定是否感染结核菌的一种传统方法。 四、试验目的 （4）结核菌素试验还可作为婴幼儿结核病诊断的参考，测定肿瘤患者的非特异性细胞免疫功能及在未接触过卡介苗的人群中调查结核病的流行情况。 结核菌素试验广泛应用于：结核菌感染的流行病学调查、结核病流行情况监测、寻找高发人群（主要是儿童、少年）、选择化学预防对象、考核卡介苗接种质量、了解机体细胞免疫功能等方面。 卡介苗：“出生第一针”。 接种的主要对象是新生婴幼 儿，接种后可预防发生儿童 结核病，特别是能防止那些 严重类型的结核病，如结核 性脑膜炎。如果出生时没能 及时接种，在1岁以内一定 要补种。 五、试验程序 结核菌素试验方法很多，常用的是芒图（Mantoux）氏法，即将PPD用无菌生理盐水稀释成不同浓度，取0.1毫升注射于左前臂掌侧前1/3中央皮内（注意：左手），72（48h～96h）小时检查反应情况，应注意局部有无硬节，不可单独以红晕为标准。 五、试验程序 我国规定以72小时为观察反应时间，48-96小时内皆可测量反应，常用的记录方法是将测得的硬结用平均直径（横径毫米数+纵径毫米数）÷2表示，如有水泡、硬结、坏死和淋巴结炎时，应作记录。 五、试验程序 阴性反应：无硬结或硬结平均直径5mm者。如果不存在任何硬结，结果应记