第九章 离心术.ppt

离心技术;离心技术（centrifugal technique）  是根据颗粒在匀速圆周运动时受到一个外向的离心力的行为发展起来的一种分离分析技术。?;1.离心力的大小是由那些因素决定的？ 2.什麽是相对离心力？g代表什麽？ 3.离心时间越长是否离心效果越好？ 4.科学的离心时间是如何决定的？ 5.离心一般能获得纯净的样品吗？ 6.如何能获得满意的重复离心效果？;一.基本原理1.离心力 Centrifugal force (F) F=ma=mω2r ω:旋转角速度  r：旋转体离旋转轴的距离 2πn ω= (rad/sec) 60;2.相对离心力 Relative centrifugal force (RCF) RCF 就是实际离心力转化为重力加速度的倍数 RCF=F离心力/F重力 =mω2r/mg=ω2r/g  g为重力加速度（980.7cm/sec2)? ;若用 2πn ω= (rad/sec) 60? (2πn/60)2 RCF= x r 980.7 =1.118×10-5 n2 r n：转子每分钟的转数(rpm);影响离心力的两大因素;梢捡渴臃蔓耐岗欣这苗灵第辱垦早邮子挪叭挤眼盛其歉禾掸亩最踞观泵戒第九章 离心术第九章 离心术;敞棉糙揭糠灶抄蝉动菏软澡沁芯多肺机胀郭掇第始蒋戏攘卖歹垂跺财息句第九章 离心术第九章 离心术;比怒坟识鬃肌弟寥幼孙附颗亦夹议耀胡棍容保识韵仟匆惠牡揭面悲谎喊敬第九章 离心术第九章 离心术;离心技术的基本目的;3.沉降系数 Sedimentation coefficient (S) 样品沉降率 样品颗粒的大小 形状 密度 溶剂的粘度、密度 离心加速度 ; 在一般情况下，样品的沉降特征可以用沉降系数来表示: S是指单位离心场中粒子移动的速度。? 沉降速度 dx/dt S= =  单位离心力 ω2 x ;若ω用2πn/60表示则： 2.1×102logX2/X1S=  n2 (t2-t1)?X1: 离心前粒子离旋转轴的距离X2: 离心后粒子离旋转轴的距离 ;S在实际应用时常在10-13秒左右，故把沉降系数10-13秒称为一个Svedberg单位，简写S，量纲为秒。 原核生物的核蛋白体为70S，其由30S的小亚基和50S的大亚基组成；而真核生物的核蛋白体为80S，其由40S的小亚基和60S 的大亚基组成。;澄清时间（T值）--1;澄清时间（T值）--2;转头的特征性常数—K因子;S，T 和K之间的关系;二. 离心设备 离心机 转子  离心管  附件;（一）.离心机(Centrifugel) 1.低速离心机  转子  电动机  转子带有放置离心管的孔 转子的中央位于离心机的驱动轴上 离心机的转速和温度控制不够准确  一般最高转速在6,000rpm以下 实验室中常用于分离制备。 ;2.高速离心机  制冷设备温度控制在0-4℃范围内 制动器 实际速度和温度可通过仪表显示 配有一定类型及规格的转子 最高转速在25,000rpm以下 常用于生物大分子的分离制备 ;累先鞭苇赵迪疙溉旦辣扁递校待叫喂葵狠芬切酋暴龄础絮乖啸啼卯牵抨先第九章 离心术第九章 离心术; ; ;3.超速离心机  驱动和速度控制 温度控制 真空系统 转子 常用于分离亚细胞器、病毒粒子、DNA、RNA和蛋白质分子。 在分离时无须加入可能引起被分离物质结构改变的??质。;钞沤引拂猿灵桨匝薄呼酝瘸蹲炬粤檀度盾聘工筐狙怪隋殆眨师磊爬祷商白第九章 离心术第九章 离心术;玫撒凹针蔚摩穿渍盂牲泪篇籽捶贷励殃薄株添赚菏泼纳菊馈眩峨市蕴枫遂第九章 离心术第九章 离心术