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机能实验学探索性实验设计开题报告
题 目:硫酸镁、戊巴比妥钠和乙醇对水合氯醛麻醉作用的影响
专 业:预防医学(食品安全)
年 级:-- 2008级
姓 名:徐珮琦 龚玲 郑清 郑芳 陈锦萍 陈丹
学号:113200800910020 113200800910013 113200800910006 113200800910012 113200800910029 113200800910032
导 师:----张 梨---------------------
课题名称:乙醇、硫酸镁和戊巴比妥钠对水合氯醛麻醉作用的影响
选题目的与意义
水合氯醛,是一种具有刺鼻的辛辣气味,味微苦的无色透明结晶固体,有毒。水合氯醛的作用虽大,然而它的副作用却是不容忽视的。水合氯醛会对胃黏膜有刺激,易引起恶心、呕吐;大剂量能抑制心肌收缩力,缩短心肌不应期,并抑制延髓的呼吸及血管运动中枢;它还会对肝、肾有损害作用。 因此,在兽医临床上作为麻醉剂时常与硫酸镁、戊巴比妥钠和酒精复合使用,可以减少水合氯醛使用剂量,明显减少副作用,提高安全保障。对此,我们选择硫酸镁、戊巴比妥钠和乙醇这三种试剂,通过本实验,我们可以观察这三种试剂对水合氯醛催眠作用的影响[1],从而为兽医临床上水合氯醛麻醉时联合用药提供依据。
(三)本课题研究的历史与理论依据
水合氯醛为催眠药、抗惊厥药,它还是兽医临床上的最常用非吸入性麻醉剂。吴帮启[2]等在相关试验中证实大剂量水合氯醛经腹腔注射后能对中枢产生抑制作用从而达到使大鼠昏迷的结果,并具有部分收缩脑血管的作用,从而使脑血流量减少的效果。沙爱龙[3]在研究中提出水合氯醛是神经元间阻断剂,可使神经元之间的回路传导阻断,因而可以产生中枢性的抗痉挛和精神安定的作用。水合氯醛主要抑制网状结构上行激活系统,阻断神经冲动的传导而使大鼠昏迷。
戊巴比妥钠在非麻醉剂量时主要抑制多突触反应,减弱易化,增强抑制作用[4]。此作用主要见于GABA能神经传递的突触。它增强GABA介导的Cl内流,减弱谷氨酸介导的除极。但与苯二氮类不同,巴比妥类是通过延长氯通道开放时间而增加Cl内流,引起超极化。较高浓度时,则抑制Ca依赖性动作电位,抑制Ca依赖性递质释放,并且呈现拟GABA作用,即在无GABA时也能直接增加Cl内流。
乙醇主要是一个中枢神经系统抑制剂。低浓度乙醇可加强某些兴奋性神经突触的功能,能使记忆力,集中力和洞察力变得迟钝甚至丧失。乙醇也可引起镇静,解除焦虑,进而语言含糊,共济失调,判断能力受损,进入酩酊状态[5]。多年来认为乙醇、挥发性麻醉药和巴比妥类对中枢神经系统的抑制作用是由于这些药物能溶于脂质细胞膜,使嵌在膜内的离子通道以及其他蛋白质功能紊乱所致。近年来有研究注意到乙醇对兴奋性氨基酸(谷氨酸盐)和抑制性氨基酸(γ氨基丁酸即GABA)激活离子通道功能的作用。乙醇和麻醉性巴比妥类均能加强GABA介导的突触抑制和氯的流出。
镁是人体细胞内第二重要的阳离子,是很多酶的辅因子,与肌肉收缩、神经传导等有重要关系。硫酸镁对静脉麻醉药的影响目前临床研究主要集中在应用最广的异丙酚、氯胺酮这两个静脉麻醉药上。异丙酚通过增强抑制性神经递质 GABA与 GABAA受体复合体的结合或直接作用于 GABAA受体复合体 ,引起抑制性激发电位 开放 C l -通道增强了 GABA的神经抑制作用 ;另一方面通过抑制谷氨酸在中枢的释放 ,减少谷氨酸对 NM DA受体的激动降低兴奋性神经元的活性 ,从而抑制了大脑皮层、皮质下区、丘脑和中脑 ,产生麻醉作用[6]。
(四)实验动物:小鼠
性别:随机 体重:18-30g/只 年龄:成年 数量:9只
(五)所学特殊器材、试剂的种类和数量
特殊器材:小鼠多功能自主活动记录仪
试剂:水合氯醛、乙醇、硫酸镁、 戊巴比妥钠、Nacl溶液、20μl加样枪、200μl加样枪、5ml试管 、1ml注射器5支、针头若干、电子分析天平、酒精棉球、干棉球、大小鼠灌胃针 计时器
(六)主要观察指标:小鼠的麻醉起效时间时间、麻醉持续时间,单位时间内小鼠的自主活动次数
(七)主要实验方法和步骤:
预实验:
目的:1、确定能使小鼠进入麻醉状态的水合氯醛的剂量,及硫酸镁、戊巴比妥钠、乙醇能对水合氯醛麻醉小鼠产生影响的有效剂量
2、熟悉相关实验技术手段,发现设计中的不足并及时修改确保正式实验能够达到预期目的。
步骤:
动物准备:取小鼠(禁食12小时),随机分成 A、B、C、D四组,其中A组为对照组,每组两只,剩余一只备用。为实验的下一步配置好2%的水合氯醛,10%的硫酸镁溶液、2%戊巴比妥钠溶液、30%的乙醇和生理盐水。
给每组的小鼠用腹腔注射2%水合氯醛0.1ml/10g后3分钟,再给A组小鼠腹腔注射
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