10第十章巴比妥及苯并二氮杂卓类镇痛催眠药物的分析.ppt.ppt

取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于硫喷妥钠0.25g），置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，量取此溶液用0.4%NaOH溶液定量稀释制成每1ml中约含5?g的溶液；另取硫喷妥对照品，精密称定，加0.4%NaOH溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含5?g的溶液。照分光光度法，在304nm的波长处分别测定A，根据每支的平均装量计算。每1mg硫喷妥相当于1.091mg的C11H17N2NaO2S。 如注射用硫喷妥钠的含量测定 2. 经提取分离后的紫外分光光度法 根据巴比妥类药物具有弱酸性，在氯仿等有机溶剂中易溶，而其钠盐在水中易溶的特点，本法可消除干扰物质对巴比妥类药物测定的影响。取钠盐加水溶解，加酸酸化，用氯仿提取后再加碱反提。排除辅料或杂质的干扰。 测定方法-取两份相等的供试溶液，分别制成两种不同的化学环境（如在其一中加酸、碱或缓冲液改变溶液的pH，或在其一中加能与供试品发生某种化学反应的试剂），然后将两者分别稀释至同样浓度，一份置样品池中，另一份置参比池中，于适当波长处，测其吸收度的差值（?A值）。 3. 多组分混合物不经分离的定量方法——计算分光光度法差示分光光度法（?A法） 必要条件 （1）供试品在不同的化学环境中以不同的分子形式存在，它们的吸收光谱有显著的差异。 （2）干扰物的吸收不受测定时化学环境的影响，光谱行为不变。 供试品在两种不同的化学环境中分别以x、y 表示，干扰物用 z 表示 3. 定量依据 即，吸收度差值（?A）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，即干扰组分的干扰被消除。 可用对照法或标准曲线法定量 保留了通常的分光光度法简易快速、直接读数的优点，又无需事先分离，并能消除干扰。 特点 应用 （1）于波长240 nm处，测定pH10和pH2两种溶液的吸收度之差 （2）于波长260 nm处，测定pH10和强碱溶液的吸收度之差 （五）、高效液相色谱 HPLC法同时测定人血清中苯巴比妥、苯妥英和卡马西平的浓度 色谱条件：色谱柱 AgilentZORBAX SB- C18柱( 250 ×4.6mm ,5μm) , 流动相为甲醇∶水∶乙腈(45∶45∶10 ） 流速1.0ml/min, 柱温30℃, 检测波长254nm。 血样处理：取内标溶液100μL，60℃水浴氮气吹干，加200μL待测血清, 加提取液（氯仿：乙酸乙醋=50：50）2ml, 旋涡混合5min, 以4000转/分离心10min, 用吸管吸取上层水层, 弃去。用移液管移取有机相置带盖尖底塑料离心管中, 于60℃水浴中氮气吹干, 用流动相200μL溶解, 取20μL进样测定 方法验证：标准曲线与线性、精密度（RSD 3%) 、方法回收率、提取回收率（大于87%）、稳定性等均符合中国药典的要求 第二节 苯并二氮杂卓类药物的分析 药物结构： 硝西泮 阿普唑仑 药物性质 1. 苯并二氮杂卓母核 弱碱性 2. 结构中的环一般比较稳定，但在酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮衍生物。 3.不同pH条件下离子状态不同，UV不同 1. 沉淀反应 氯氮卓 橙红色沉淀 阿普唑仑 盐酸氟西泮 ＋ KBiI4 也生成橙红色沉淀 氯硝西泮 放置后，沉淀颜色变深， 二、鉴别试验 阿普唑仑 + 遇硅钨酸 白色沉淀，药典中用于鉴别。 (一)化学鉴别试验 2. 硫酸-荧光反应 本类药物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，显 不同颜色的荧光。例如： 地西泮 黄绿色 黄色 氯氮卓 黄色 紫色 艾司唑仑 + H2SO4 亮绿色 + 稀硫酸 天蓝色 硝西泮 淡蓝色 蓝绿色 奥沙西泮 淡黄绿色 4. 含卤素 （二）特征基团反应 2.水解后呈芳伯胺反应 1.氯化物的鉴别试验 （三）紫外特征吸收和红外吸收光谱 （四）色谱法 TLC法 酸水解产物的TLC法 三、特殊杂质与检查 氯氮卓中有关物质的检查：HPLC法 三唑仑中有关物质的气相色谱检查 四、含量测定 （一）非水溶液滴定法 药物名称 取