尿酮体尿胆红素尿胆原尿血红蛋白尿肌红蛋白乳糜尿定性检查-培训课件.ppt

邱群凤 尿液检验 2016 Mar. 龙岩市第一医院 1.尿酮体检查 2.尿胆红素检查 3.尿胆原检查 4.尿血红蛋白检查 5.尿肌红蛋白检查 6.乳糜尿检查 当机体能量代谢发生障碍，脂肪分解代谢增加，血中酮体升高，过多的酮体从尿中排出，称为酮尿。 实验一 尿酮体改良rothera法定性检查 (罗瑟拉) 实验一 尿酮体改良rothera法定性检查 【原理】 本法对 乙酰乙酸 灵敏度为80mg/L 丙酮 灵敏度为 1000mg/L +亚硝基铁氰化钠 → 紫色化合物 丙酮 乙酰乙酸 碱性条件 亚硝基铁氰化钠法(改良rothera法) 【操作】（详见实验课本 P96 ） 1．加酮体粉 : 1小勺 2．滴加尿液 : 2~3滴,没过酮体粉为宜 3．观察结果 : 如下规则 ①立即出现深紫色 强阳性 +++~++++ ②立即呈现淡紫色后渐转深紫色 阳性 ++ ③逐渐呈现淡紫色 弱阳性 + ④5min内无紫色出现 阴性 - 【干扰因素】 假阳性 较多肌酐、肌酸，高色素尿， 酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物 假阴性 ①标本收集和保存不当； ②亚硝基铁氰化钠对温度、热度或光线很灵敏； ③试带受潮失活。 【注意事项】 1.试剂配制要准确,易受潮,应密闭、干燥保存； 2.乙酰乙酸不稳定,丙酮易挥发,使用新鲜尿液； 3.控制反应温度,实验室温度过低时在30℃水浴箱中完成； 4.存在大量非结晶尿酸盐时，可能出现橙色反应影响结果判断，离心除去。 实验二 尿胆红素Harrison法定性检查 胆红素+氯化钡→沉淀+三价铁→胆青素/胆绿素/胆黄素 (蓝绿色/绿色或黄绿色) 酸性条件 ↓ 【原理】 (哈里森) 【操作】（详见实验课本 P97 ） 1.加尿液: 加尿液5ml 2.吸附胆红素: 加2.5ml氯化钡溶液于尿中→混匀→离心3~5min→弃上清液 3.加试剂: 向沉淀表面加Fouchet试剂2滴→放置片刻,观察沉淀表面颜色变化 4.判断结果 ①沉淀即刻变为蓝绿色 强阳性 +++ ②沉淀变为绿色 阳性 ++ ③沉淀逐渐变为淡绿色 弱阳性 + ④长时间不变色 阴性 - 【结果判断】 【干扰因素】 假阳性 水杨酸、阿司匹林、牛黄→紫红色→ 干扰Harrison法. 假阴性 ①标本保存不当（未避光） ②Fouchet试剂加入的量不准确 【注意事项】 1. 使用新鲜尿液,避光收集,碱性尿液先酸化; 2. 保证硫酸根离子充足,确保能产生沉淀; 3. 严格控制加入Fouchet试剂量; 4. 注意可能影响结果药物的因素; 5. 改实验法优点:灵敏度较高,0.9umpl/L 实验三 尿胆原改良Ehrlich法定性检查 【原理】 尿胆原+对二甲氨基苯甲醛→樱红色化合物 ①简单快速，分析仪，定性或定量； ②不同试带灵敏度不同（1-4mg/L）。 ③偶氮反应试带不受胆红素影响，对尿胆原特异。 方法学评价 (埃利希) 酸性条件 ↓ 【操作】（详见实验课本 P99 ） 1.加入氯化钡除去胆红素: 尿液与Bacl2比例为 4:1 2.加尿液:加尿液`shang qing ye 2ml 3.加试剂:加Ehrlich试剂0.2ml,室温下静置10min 4.观察结果:在白色衬纸下,从管口向管底观察颜色变化 5.稀释阳性标本并重复操作 ( P99 ) ①不变色,加温后无反应 阴性 - ②10min后呈微红色 弱阳性 + ③10min后呈樱红色 阳性 ++ ④立即呈深红色 强阳性 +++ 【结果判断】 干扰因素 评 价 标本因素 ①标本久置，尿胆原氧化为尿胆素--假阴性 ②尿胆原含量 与饮水量、排尿时间、尿液PH有关 药物因素 ①假阳性：吩噻嗪类、氯丙嗪类、磺胺类、普鲁卡因 ②假阴性：大量VitC、长期服用广谱抗生素。 内源性物质 假阳性：卟胆原、吲哚、胆红素→红色。 【干扰因素】 Ehrlich醛反应 【注意事项】 1．尿液标