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酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay ，ELISA) 基础:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂： （1）固相的抗原或抗体，即免疫吸附剂； （2）酶标记的抗原或抗体，称为结合物； （3）酶作用的底物 ELISA基本原理 （1）使抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；（2）使抗原（或抗体）与某种酶联结成酶标抗原（或抗体），而且此酶标抗原（或抗体）既保留其免疫活性，又保留其酶活性；（3）测定时将受检标本（抗体或抗原）和酶标抗原（或抗体）按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应，再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例；再加入酶反应底物后，底物被酶催化后变为有色产物，根据其颜色反应的深浅进行定性或定量分析，以了解被测标本中抗体或抗原含量 竞争法ELISA可用于抗原和半抗原的定量测定，也可对抗体进行检测， 其原理是标本中的抗原（抗体）和一定量的酶标抗原（抗体）竞争与固相抗体（抗原）结合。标本中抗原（抗体）含量愈多，结合在固相上的酶标抗原（抗体）愈少，最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。 1、双抗体夹心法，属于非竞争结合测定。它是检测抗原最常用的ELISA，适用于检测分子中具有至少两个抗原决定簇的多价抗原，而不能用于小分子半抗原的检测。 2、双抗原夹心法 若采用固相载体上的抗原和酶标抗原分别与样品中被检测抗体分子结合，则是双抗原夹心法。双抗原夹心法，属于非竞争结合测定。它是检测抗体的ELISA。 间接法 此法是测定抗体最常用的方法,属非竞争结合试验。 基本原理是将抗原连接到固相载体上，样品中待测抗体与之结合成固相抗原-受检抗体复合物，再用酶标二抗(针对受检抗体的抗体，如羊抗人IgG 抗体)与固相免疫复合物中的抗体结合，形成固相抗原-受检抗体-酶标二抗复合物，测定加底物后的显色程度，确定待测抗体含量。 捕获法（亦称反向间接法）ELISA，主要用于血清中某种抗体亚型成分（如IgM）的测定。因血清中针对某种抗原的特异性IgM 和IgG 同时存在，则后者可干扰IgM 的测定。 工作原理：先将针对 IgM的第二抗体（如羊抗人 IgMμ 链抗体）连接于固相载体，用以结合（“捕获”）样品中所有IgM（特异或非特异），洗涤出去IgG 等无关物质，然后加入特异抗原与待检IgM结合；再加入抗原特异的酶标抗体，最后形成固相二抗- IgM-抗原-酶标抗体复合物，加酶底物作用显色后，即可对样品中待检IgM 是否存在及其含量进行测定。 * ---多能的细胞因子 主要内容 细胞因子及分类 白细胞介素简介 白介素分类介绍 酶联免疫吸附法 细胞因子及其分类 细胞因子 是由细胞分泌的具有介导和调节免疫、炎症和造血过程的小分子蛋白物质。 分类 白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、生长因子、趋化因子 Title B 白细胞介素简介 在1979年第二届国际淋巴因子专题讨论会上命名 白细胞介素，简称白介素，是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子。 作用：白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。 将来自单核-巨噬细胞、T淋巴细胞所分泌的某些非特异性发挥免疫调节和在炎症反应中起作用的因子称为白细胞介（interleukin，IL）。 白介素分类 白介素以阿拉伯数字排列，如IL-1、IL-2、IL-3 到现在已发现30多种 IL-1、IL-2、IL-6 与肿瘤相关的有IL-1、IL-6、IL-12、IL-23、IL- 27、IL-32等。 IL-4、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12、IL-15、IL-17、IL-18、IL-22、IL-29、IL-32、IL-33等。 IL-1(又称淋巴细胞刺激因子) 活化的单核和 （或 ）巨噬细胞合成与分泌，另外有树突细胞、郎格罕氏细胞、上皮细胞、成纤维细胞、神经胶质细胞 IL-1由两种促效剂(IL-1a 和IL-1β)和一种拮杭剂(IL-1受体桔杭剂)组成。  （1）介导炎性反应（2）免疫调节作用。（3）诱导急性时相蛋白，参与急性期反应。（4）参与恶液质的形成，致负氮平衡效应。（5）诱导成纤维细胞增殖 （1）眼底病变（2）肥胖与2型糖尿病联系的主要原因（3）炎症反应（4）肿瘤（5）白介素 -1α 及白介素 -1β 对体外培养的黑素细胞增殖及黑素生成都