胡萝卜与黄芪细胞融合技术的研究.pdfVIP

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胡萝卜与黄芪细胞融合技术的研究论文

摘 要 摘 要 黄芪[Astragalus 其干燥根为常用滋补中药材,含有活性较强的三萜皂苷、黄酮类、多糖类、氨基酸、微 量元素以及棕榈酸、羽扇豆醇等。但由于草原荒漠化以及乱采挖等原因,药用野生黄芪 资源已十分贫乏,即使采用人工栽培的方法不仅产量不能满足市场需求,而且品质也得 不到保证。胡萝卜是植物组织培养中经典实验材料之一,也是近年来进行遗传操作的主 要材料。以胡萝卜原生质体为受体,进行外源基因导入的研究,首先要建立一套稳定、 高效的原生质培养系统。因此,用细胞融合等现代生物技术将中药黄芪的药用成分基因 转入胡萝卜中,为提高种质资源生物量、优化品质具有重要意义。 1.建立了由黄芪叶片诱导愈伤组织的技术体系。愈伤组织的诱导效果受培养基、植 物生长调节激素种类、浓度以及配比等因素的影响。将叶片接种在Ms的诱导培养基上, ▲ 获得愈伤组织;然后在添加2,4-D的MS增殖培养基上获得增殖培养。 t二. 2.以黄芪叶片和愈伤组织为材料,对黄芪原生质体的制备分离技术进行了研究。结 ▲ 果表明:采用黄芪叶片制备原生质体远远优于黄芪愈伤组织,能够获得高产量高活力的 40rpm)恒温摇床上水解12小时就能达到较好的分离效果,获得高质量的黄芪原生质体, 并且黄芪原生质体纯化时以800rpm离心6~8分钟效果较好。 生质体融合,从PEG不同浓度、不同处理时间以及不同原生质体密度对原生质体融合的 影响等方面优化了融合条件。6一8d观察到第一次细胞分裂,25~30d形成多细胞团, 继续培养获得愈伤组织。 龟 4.进行电融合时最适宜的电场参数为:交流电场强度40V/am、直流脉冲场强 700V/cm、脉冲宽度40ps,在此参数下的电场处理不影响原生质体的活力。 、 关键词:胡萝l、,黄芪,愈伤组织,悬浮细胞,原生质体,细胞融合,组织培养 Abstract ^ the roots is vivaciousofFabaceae.His Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bungeplant aretheusualnutritiousmedicinal containactive material,which acidand polysaccharide、aminoacid、microelement、palmiclupe01.Becauseofplaindeserting andexcessive resourceof is however,the cutting Astragalus ourselvesnot callnotmeettheneedsof also verynecessitous.Culturingby only market,but cannot the carotavat.salivusHoffm.isoneofthe certifyq

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