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草莓FragariaananassaDuch果实MADSbox基因的克隆与表达初探论文
本研究的主要资助项目
河南省重点科技攻关项目(092102110038)
中国农业科学院科技经费项目(2009)
r
目录
目录
摘要………………………………………………………………………………………………………………．．I
Abstract………………………………………．………………………………………………………………．．III
第一章文献综述……………………………………………………………………．．1
1．1MA
DS．box概j丕…………………………………………………………………………………．．1
1．1．1MADS．box概念…………………………………………………………………………．1
1．1．2
MADS．box的种类和结构……………………………………………。l
1．1．3
MADS．box家族基冈的分类及其功能的多样性……………………．3
1．1．4与果实成熟相关的MADS基因………………………………………7
1．2草莓果实成熟及基因克隆研究……………………………………………。8
1．2．1草莓果实发育成熟过程中的生理变化………………………………8
1．2．2果实软化相关基因的克隆……………………………………………9
1．2．3草莓的转基因研究……………………………………………………lO
第二章引占…………………………………………………………………………1l
2．1研究背景……………………………………………………………………11
2．2研究的目的与意义…………………………………………………………11
．2．3研究的范围与内容……………………………………………………………11
第三章草莓果实MADS．box基因保守片段的克隆与序列分析…………………13
3．1实验材料、试剂及仪器……………………………………………………一13
3．1．1实验材料……………………………………………………………～13
3．1．2主要试剂……………………………………………………………．．13
3．1．3菌株…………………………………………………………………………………………13
3．1．4引物…………………………………………………………………………………………l3
3
3．1．5实验仪器……………………………………………………………一1
3．2实验方法……………………………………………………………………14
3．2．1实验材料RNA的提取………………………………………………．14
3．2．2
RNA纯化及检测……………………………………………………．14
3．2．3
cDNA合成………………………………………………………………………………．15
3．2．4PCR扩增体系、程序及琼脂糖电泳………………………………．．16
3．2．5
PCR扩增目的片段产物回收…………………………………………．．16
7
3．2．6目的片段与T-载体的连接…………………………………………．．1
3．2．7连接产物转化(热激法)、涂板及菌液培养………………………17
8
3．2．8测序结果分析………………………………………………………．．1
3．3结果与分析…………………………………………………………………．18
3．3．1草莓果实RNA提取结果……………………………………………18
3．3．2
3．3．3序列及系统发育分析…………………………
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