BD LSR II 系统组成部分BD LSR II 流式细胞仪.PDF

第一章第一章 、、BD LSR II 系統組成部分系統組成部分 第一章第一章 、、 系統組成部分系統組成部分 BD LSR II 流式細胞儀流式細胞儀 流式細胞儀流式細胞儀 BD LSR II 是世界上第一台可配備四支固定校準的 、氣冷式雷射的桌上型流式細胞儀，它 同時分析多過 10 色螢光參數 。集靈活易用、UV 雷射 、數字化電子系統於一身的BD LSR II ，可 滿足更廣泛的多色流式分析 ，使您最大限度地集中精力於科學研究，而不是複雜的軟硬體操作。 儀器的設計核心是其新式數位化數據處理系統 ，使BD LSR II 成為唯一真正的數位化流式細 胞儀 。BD LSR II 的數位化系統可實現每秒鐘處理一干萬次的高速分析 ，同時儀器革新化的脈衝 處理技術 ，通過分析信號脈衝的面積、寬度，區分實體組織標本中的粘連細胞群體，最大程度地 減少假陽性 ，是實體組織DNA 分析的終極解決之道 ；對兩種螢光信號比率的計算亦可用於鈣離 子流動的檢測 。 BD LSR II 的光導纖維系統將每一支雷射光束精確 、穩定地匯聚在光束形成棱鏡上 ，再通過 棱鏡 ，將雷射光束投射至聚焦透鏡上。信號收集系統被設計成八角形排列，這種設計可最大 程度地從每一個雷射器中檢測光信號 。每一個 PMT 之前的帶通濾光片，允許用戶對所需收 集的光譜範圍做精細調節 。由於反射比透射的效率更高，所以這種設計提高了該儀器在多色 分析時的檢測性能 。 靈活性靈活性 ：：BD LSR II 可容納 1 至 4 根雷射 。所有雷射器都是氣冷且帶固定校準，並配備動 靈活性靈活性 ：： 態範圍相適 、優越功能的PMT 。 UV 雷射雷射 ：：首次配置於桌上型流式細胞儀 ，固定校準，容易使用。可常規用於 Indo-1 測定 、 雷射雷射 ：： Ca+ 通量 、DAPI 或 Hoechst 分析活細胞 DNA 。 多色分析多色分析 ：：螢光染劑選擇範圍增加 。除了標準 488nm 激發的螢光染劑之外 ，還有 UV 激 多色分析多色分析 ：： 發的螢光染劑如 DAPI 、Hoechst 33342 、Indo-1 、GFP ；HeNe 激發的螢光染劑如 APC 等。 1 1.1 BD LSR II 系統基本結構系統基本結構 ：： 系統基本結構系統基本結構 ：： BD LSR II 細胞分析儀主體 BD FACSDiva 電腦工作站 流式細胞儀包括液流系統 、光學系統、和電子系統。待測樣本中的細胞經液流系統傳送依序 地通過細胞儀中雷射照射的區域 ，細胞受雷射的激發產生信號，被信號接收器接受並放大，這些 放大了的信號經電腦分析處理 ，並以圖表的形式直觀地顯示出來。流式細胞儀產生並分析的信號 主要有光散射信號和螢光信號 。光散射信號的強弱可以反映細胞的大小、形態及胞漿顆粒化的程 度等 。依螢光素的不同 ，用不同波長的光激發 ，發射出不同波長的螢光 ，可顯示不同的顏色 ，在 不同的實驗體系中 ，這些螢光信號就可以反映不同的細胞生物學特性 。 LSR II 細胞儀細胞儀主體主體 ：： 細胞儀細胞儀主體主體 ：： 正面示意圖正面示意圖 正面示意圖正面示意圖 BD LSR II 主機組成分主機組成分 主機組成分主機組成分 2 1.2 Fluidics 液流系統液流系統 液流系統液流系統 液流系統包含 Sample injection tube 樣品上樣針(SIT) 、flow cell 流動室 、兩個儲液筒 、及 一系列液體輸送管線 。