细胞支原体污染的图片危害表现和办.docxVIP

PAGE5 / NUMPAGES5 细胞支原体污染的图片、危害、表现和怎么办 （2016年10月16日） 细胞支原体污染的图片 我们首先来认识一下，细胞支原体污染与非污染的图片有什么区别。 如上图所示，左侧为未经支原体清除试剂处理的人Hela细胞,经DAPI染色后，除了细胞核为蓝色外，细胞质也有大量的絮状核酸物质被染成蓝色，这些处于细胞质的核酸物质就是支原体DNA，说明细胞支原体污染非常严重。 而右侧为经过本公司的支原体清除试剂2处理7天的Hela细胞，经DAPI染色后，除了细胞核为蓝色外，细胞质没有任何絮状核酸物质被染成蓝色，说明支原体已经被清除。（版权声明：上图来自上海易色医疗科技有限公司网站。） 细胞支原体污染的危害和表现 细胞支原体污染的危害（1）? ? 培养的细胞被支原体污染后，几乎可以改变细胞的所有功能，其可以导致细胞染色体的异常和损伤，改变细胞的代谢、生长、形状、附着，影响病毒的扩增能力和产量等等。例如， HYPERLINK /pubmed?term=Miller%20CJ%5BAuthor%5Dcauthor=truecauthor_uidMiller CJ等人通过Microarray的研究表明：支原体污染严重改变被污染细胞的基因表达谱?[1, 2]，支原体污染后与无污染的同一细胞系相比，表达差异达2倍以上的基因就有200多个！！！（详细数据请见参考文献 1）。Edward Burnett?和?Liz Penn认为：被支原体污染的细胞系已经不是原来的细胞系，而是另外一个细胞系了?[3]！此外，严重的支原体污染将彻底摧毁一株细胞系。 从2013年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体检测。相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。 ? 总之，在细胞系上进行生物医学方面的科学研究，如果不能保证所用的细胞系无支原体污染（Mycoplasma-free），则所得出的结论是极端不可靠甚至是完全错误的！可以想象：全球范围内，每年因支原体污染导致白白浪费的科研经费的数量是多么的巨大，有人估计至少高达数十亿美金！ ?????????细胞支原体污染的危害（2）???????? 1.???????细胞生物学：支原体污染将直接导致最常用的MTT细胞毒性实验结果的严重错误！ 结果：由于支原体对MTT的额外还原作用，对阿霉素（Doxorubicin,?一种抗肿瘤药物）的抗性，支原体污染和非污染的细胞二者相差15倍！（Due to an additional reduction of tetrazolium by mycoplasmas, contaminated cells appeared up to 15 fold resistant to doxorubicin.） 参考文献：Falsification of tetrazolium dye (MTT) based cytotoxicity assay results due to mycoplasma contamination of cell cultures. Anticancer Res. 1999 Mar-Apr; 19(2A):1245-8. ? 2.???????免疫学：支原体污染本身将可以直接诱导树突状细胞的成熟！这对于目前国内外普遍开展的人体免疫细胞的肿瘤治疗将是灾难性的。 结果：（1）The capacity of these cell lines to induce DC maturation was due to their contamination by mycoplasma. Our results reveal that DC are able to sense mycoplasma infection and mature as they do in response to most viruses and bacteria.（2）Further investigation demonstrated that the changes in DC phenotype and?functions?were due to the presence of mycoplasmas in these two cell lines; eradication of mycoplasmas completely abolished the observed effects, and importantly, pure mycoplasmas in the absence of tumor cell supernatants were able to produce the sa