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选修3 现代生物科技专题知识点汇编
专题1 基因工程
一.知识网络
概念:又叫DNA重组技术,是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
来源:主要从原核生物分离纯化
限制性核酸内切酶(限制酶) 作用:识别双链DNA中某种特定的核苷酸序列,并使特定部位的磷酸二酯键断开
结果:产生黏性末端或平末端
基 来源:大肠杆菌
本 作用 :连接黏性末端
工 来源:T4 噬菌体
具 作用:可连接两种末端
常用载体:质粒
能在受体细胞中复制并稳定保存
基因进入受体细胞的载体 必备条件 具有一至多个限制酶切点
(“分子运输车”) 具有标记基因
其他载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒
目的基因的获取
基因表达载体
的构建
将目
的基
因导
入受
体细
胞
目的基因的
检测与鉴定
基因工程
应用
二.考点解析
1.限制性核酸内切酶
⑴来源:多数来自原核生物。
⑵作用特点:
①将外来的DNA切断,它们能即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,达到保护自身的目的。
②专一性:只能识别DNA分子中特定的核苷酸序列,且只能在每一条链中特定的部位进行切割,这种能被特异性识别的切割部位都具有回文序列。
(3)作用结果:形成黏性末端或平末端
(4)作用实质:使特定部位的两核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
2.DNA连接酶
(1)作用实质:使两DNA的双链片段末端缺口之间形成磷酸二酯键而连接成一个DNA。
E·coli DNA连接酶 来源:大肠杆菌
(2)常用种类及作用 作用:使黏性末端之间连接
T4DNA连接酶 来源:T4噬菌体
作用:几能连接黏性末端,也能连接
平末端,但后者效率低
3.DNA聚合酶
作用:将单个核苷酸加到已有的核苷酸链末端上,形成磷酸二酯键。
4.运载体
运载体是基因进入受体细胞的载体。在基因操作过程中使用载体有两个目的:一是将它作为运载工具,将目的基因转移到受体细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。
作为运载体必须具备以下条件:①能够在宿主细胞内复制并稳定地保存;②具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;③具有某些标记基因,便于进行筛选。
5.蛋白质工程与基因工程比较
项目 蛋白质工程 基因工程 区别 过程 预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→推测脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质 获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质 定向改造或生产人类所需蛋白质 定向地改造生物的遗传性状,以获得人类所需的生物类型或生物产品(基因的异体表达) 结果 生产自然界没有的蛋白质 生产自然界中已有的蛋
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