贞草方对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用.doc

贞草方对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用 张艺宝 陈瑛 周晨 陆聆韵 蒋金波 指导老师：徐列明 （上海中医药大学03中医临床七年制，上海201203） [摘要]目的：研究贞草方（女贞子和甘草按3：2配伍）对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用。方法：将动物随机分为正常组、CCl4模型组、女贞子组、甘草组、贞草方低剂量组、贞草方高剂量组，后4组先分别灌胃给与相应中药6d，然后1次性腹腔注射CCl4。检测血清中TBiL含量、ALT和AST活性，观察肝组织病理变化。结果：所检测的指标值中CCl4模型组与正常组相比差异无统计学意义(P0.05)。各给药组与模型组比较以及各给药组之间比较，所检测的指标值差异亦无统计学意义(P0.05)。肝脏病理学观察显示各组小鼠肝损伤虽有一定程度的差异，但也不是十分明显。结论：本次试验造模不成功，未见贞草方对小鼠CCl4急性肝损伤具有十分明显的保护作用。 [关键词]女贞子；甘草；急性肝损伤；生化指标；病理组织学 女贞子(fructus ligustri lucidi)系木樨科常绿乔木女贞的干燥成熟果实，性味甘、微苦、凉，归肝、肾经，具有滋补肝肾，明目乌发的功能[1]。甘草系豆科植物甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch．）、胀果甘草（G． inflate Bat．）或光果甘草(G．glabra L．)的干燥根及根茎，性味甘、平，归心、肺、脾、胃经，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的功效[2]。药物配伍使用是中医治疗的特色，本试验研究贞草方（女贞子和甘草按3：2配伍）对小鼠CCl4急性肝损伤[3]的保护作用。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 动物 ICR雄性小鼠72只，清洁级，体重18～22g，购于上海西普尔－必凯实验动物有限公司，合格证号：SCXK(沪)2003-0002，由上海中医药大学实验动物中心饲养。 1.1.2 药品 女贞子颗粒剂（江阴天江药业有限公司，批号0701171）每袋装1g,相当于饮片10g。甘草颗粒剂（江阴天江药业有限公司，批号0702015）每袋装0.5g，相当于饮片3g。配制女贞子组溶液浓度为0.0252g/ml,相当于生药浓度0.252g/ml；甘草组溶液浓度为0.0280g/ml,相当于生药浓度0.168g/ml；贞草方低剂量组溶液浓度为0.0532g/ml,相当于生药浓度0.420g/ml；贞草方高剂量组溶液浓度为0.124g/ml,相当于生药浓度0.980g/ml。 1.1.3 试剂 CCl4（国药集团化学试剂有限公司，批、橄榄油(国药集团化学试剂有限公司，批号、甲醛（国药集团化学试剂有限公司，批号J。 1.1.4 仪器 自动生化分析仪、组织自动脱水机、组织包埋机、石蜡切片机、摊片机、烘片机、光学显微镜等。 1.2 方法 1.2.1 动物分组 将72只小鼠随机分为正常组、CCl4模型组、女贞子组、甘草组、贞草方低剂量组、贞草方高剂量组，每组12只。 1.2.2 给药方法 置温度20~22℃，湿度48~50％ 的实验室适应环境4d后试验。自试验之日起各中药组小鼠每天给与相应的中药灌胃1次，灌胃量0.25ml/10g体重，给药量见表1。除贞草方高剂量组给药量相当于成人常用量的70倍外，其他各组给药量相当于成人常用量的30倍。正常组和CCl4模型组给予等量蒸馏水。每天灌胃1次，连续灌胃6d。 1.2.3 模型制备 末次给药1h后，除正常组腹腔注射生理盐水（10ml/kg体重)外，其余组均采用一次性腹腔注射CCl4（0.125%溶液，10ml/kg体重) 复制急性肝损伤小鼠模型[4]。 1.2.4 样品的采集和处理 CCl4注射后1d称小鼠体重，摘眼球取血，脊柱脱臼处死，称肝脏重量，计算肝指数（肝指数＝肝脏重量/小鼠体重），留取血清和肝组织样本作肝功能检测和病理学观察。 1.2.5 肝功能检测 以自动生化分析仪检测血清ALT和AST活性以及TBiL含量。 1.2.6 肝脏病理学观察 留取约5×5×3 mm3相同部位的肝组织，10％中性福尔马林固定，逐级酒精脱水，石蜡包埋。切片厚4?m，作常规H-E染色，光镜下观察肝脏组织结构、肝细胞变性坏死和炎症细胞浸润等病理变化。 1.2.7 统计方法 实验数据以均数±标准差(±s)表示，计量资料用统计分析软件SPSS12.0中的ANOVA程序进行单因素方差分析，对于方差齐的数据采用S－N－K法检验，对于方差不齐的数据采用Games-Howell法检验，P0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 肝指数的变化 由表1可见，模型组与正常组比较，差异无统计学意义，各给药组与模型组比较