水生实验动物质量监测.ppt

实验动物质量标准和监测 张 钰 广东省实验动物监测所 实验动物是指经人工培育、遗传背景清楚、对其质量实行控制、用于科学试验及产品生产的动物。 区别于实验用动物。 与实验动物相关标准 近交系、封闭群、杂交群 近交系：至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系内所有个体都可以追溯到起源20代或以后代数的一对祖先。近交系数应大于99%。 封闭群：以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群，在不从外界引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上。 杂交群：由不同品系或种群之间杂交产生的后代。 遗传监测重要性 保障品系的遗传特性 防止发生遗传突变和遗传污染 日常性监督指标 温度、日温差、相对湿度、压差； 监督性检测指标 沉降菌、氨气浓度、噪声、照度； 必要时检测指标 空气洁净度、换气次数、气流速度、昼夜明暗交替时间。 水生实验动物的质量控制 水生生物终生生活在水中，绝大部分体外受精、体外发育，在许多领域得到广泛应用，是毒性试验、环境监测、发育生物学、生理学、生态学、遗传学等研究常用的实验材料。 目前还没有质量监测标准，来保障实验用水生生物的质量。 国际斑马鱼研究中心提供974种斑马鱼，主要包括野生型和转基因和基因突变动物。 检测类别 水体质量问题 一般检查和剖检 细菌疾病 寄生虫疾病（原生虫疾病、多细胞寄生虫） 非感染性和先天性疾病 肿瘤疾病 水体质量问题（Water Quality Problems） 铜毒性 氯毒性 氨毒性 亚硝酸盐毒性 气泡病（Gas Bubble Disease） 铜毒性 表现：咳嗽反射、换气次数和氧消耗增加、部分鱼嗜睡或不协调；发育迟缓、畸胎。 显微观察：鳃和侧线损伤，肝细胞可能出现空泡。 氯毒性 鱼对氯很敏感，引起急慢性死亡。 表现：鱼鳃严重急性坏死，呼吸困难，头周围出现斑点。 显微观察：鱼鳃严重坏死。 氨毒性 表现：行为异常（兴奋过度、厌食、生长迟缓，对病原敏感），换气减少。 显微观察：鱼鳃上皮增生。 亚硝酸盐毒性 表现：组织缺氧。 气泡病 气体饱和度超过当时温度、盐度和压力条件下的最大值。 表现：皮肤、鱼鳍或鳃出现肉眼可见泡沫，眼球后组织也可见明显泡沫，眼球突出。 显微观察：组织切片可见泡沫。 一般检查和剖检（General Diagnostics and Necropsy Protocols ） 行为 体表检查 鱼腮 剖检 触片（imprints） 组织学 体表检查 ：立体解剖显微镜 异常：鱼鳍磨损、眼球混浊、溃疡、褪色、体表寄生虫和肿瘤等 制作湿片（Prepare wet mounts ） ：观察寄生虫和其它病原体 鱼腮 颜色 解剖镜下检查 ：寄生虫、囊肿、粘液过多和出血等 制作湿片：寄生虫、真菌和细菌 剖检： 体腔：腹水、出血或其它异常 肾脏：肿大、褪色 心脏：是否正常 内脏器官：白色的囊肿可能感染分支杆菌 组织压片：寄生虫、真菌或肉芽肿 触片：常用Giemsa或Diff-Quik染色 对肾脏或其它感染脏器检查原虫和细菌 组织诊断 鱼的整体（通常纵切）或有代表性的脏器进行固定，固定液Dietrich’s或Davidson，进行切片，染色镜检。 细菌疾病（Bacterial Diseases） 分支杆菌病（Mycobacteriosis ） 滑动细菌（Gliding Bacteria） 细菌性喉囊炎（Bacterial aerocystitis）—鱼鳔细菌感染 分支杆菌病 病原：海分支杆菌、脓肿分支杆菌、龟分支杆菌、偶发分支杆菌、草分支杆菌和嗜血分支杆菌等。 临床症状和病变：溃疡、出血、头部周围充血、鱼鳞凸起、鱼鳍磨损、皮肤或鳃苍白等。内脏器官白色结节。 显微观察：肉芽肿 诊断：抗酸染色、PCR确诊。 滑动细菌（细菌性鳃病、环境性鳃病） 病原：黄杆菌属、屈桡杆菌等菌属；淡水鱼主要感染柱状黄杆菌和嗜鳃黄杆菌。 临床症状和病变：呼吸困难，鱼鳍和鱼尾表现特征性鱼鳍腐蚀，白色。 显微观察：上皮增生，次级鳃瓣融合，有的坏色，病变部位可见大量细菌。 诊断：观察到细菌。 细菌性喉囊炎 病原：不能确定具体的细菌类型，免疫抑制鱼内脏细菌移植到鱼漂引起疾病。 临床症状和病变：嗜睡，聚集鱼池底部。鱼鳍基部出现红斑。 显微观察：鱼漂出现大范围损伤和严重慢性炎症。组织切片可见明显坏死，革兰氏染色可见大量细菌群落。 诊断：组织切片观察到特征性损伤，多种染色证实细菌的存在。 寄生虫病 天鹅绒疾病（Velvet Disease） 微孢子虫病（Microsporidi