临床生化检验试剂盒性能评价试验—线性范围试验资料.ppt

实验六 临床生化检验试剂盒性能评价试验—线性范围试验 临床生化试剂盒性能指标主要有 1.线性范围 这一点在试剂盒评价中很重要,是指试剂盒按说明书使用可准确测量的范围。试剂盒测定线性范围是衡量其质量的重要指标,也是保证正确使用和鉴定试剂盒关键指标之一。 临床生化试剂盒性能指标主要有 2.酶促反应时间曲线或化学反应速度时间曲线观察. 以吸光度为纵坐标，反应时间为横坐标作图，观察动态期（包栝延迟期，线性期，混和期）和平衡期出现，持续和终止的时间，分析有关性能指标。 临床生化试剂盒性能指标主要有 3.稳定性 是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其性能指标的期限 包栝原包装和工作液在指定条件下稳 定性 线性范围实验 目的与要求 掌握检测临床生化检验商品试剂盒测定线性范围的原理和方法,计量反应曲线的绘制,统计方法和性能评价;熟悉线性范围变窄的原因;了解影响线性的因素. 原理 使用不同浓度的葡萄糖标准溶液,用GOD-POD法试剂测定各自的吸光度,以标准浓度为横坐标,以其对应的吸光度为纵坐标,在方格纸上作图.即可绘制出一条直线,即剂量反应曲线(dose-response curve). 试剂 25mmol/L葡萄糖标准溶液 其他试剂同GOD-POD法试剂,试剂配制:用蒸馏水将试剂2进行10倍稀释,然后等量与试剂1混合成酶 操作步骤 按表操作.为提高计量反应曲线制作的可靠性,可将表中葡萄糖标准液和蒸馏水同时扩大10倍,制备1,2,3,4各浓度管,然后分别取20ul,各加GOD-POD试剂3ml测定. 血糖与GOD-POD试剂剂量反应曲线的制作 结果计算 1.测定结果 5个不同浓度的标本,(应每管平行做3管取平均值) 2.线性评价统计 采用回归分析,求出此直线的截距a和斜b,建立直线回归方程y=a+bx;并作相关分析,求出相关系数(r). 注意事项 1.葡萄糖标准液的加量必须十分准确,应用计量性能准确度很高的微量进样器加样. 2.本方法线性可达22.24mm/L,(指生化分析仪)造成线性变窄的原因试剂配料中组分投料不足;试剂配制后组分稳定性差;因运输或储存不当等导致试剂组分的含量发生变化. 3.酶法测定时,有时当酶量相对不足时,用标准液所作的线性范围可以达到指定的高值,但在测定同样高值样本时,结果却明显偏低,这往往 是样本中介质效应引起的，值得注意. 线形回归计算法 1.按下【MODE】【2】.进入回归分析状态,显示“LR”,同样数据前要先按【INV】【AC】,以清除可能存储的其他数据,输入X值后既按【X?.Y?】键，输入Y值后既按【DATA】键.若已知变量X的一个观察 值，求估计值Y时，可直接输入X值，随后按【Y】即可求得；若已知Y值求估计值X，则输入Y值后按【INV】【X】即可求得X值． ` ① 操作进入LR状态，清除内存【MODE】【2】 【INV】【AC】 ②输入原始数据X 【X?.Y?】， Y 【DATA】 ③输出结果 回归方程的截距【INV】【A】 回归系数【INV】【B】 相关系数【INV】【r】 【A】 * * GOD-POD试剂 3 3 3 3 3 3 (ml) 蒸馏水(ul) 10 20 16 12 8 4 0 葡萄糖标准液(ul) 0 4 8 12 16 20 0 1 2 3 4 5 加入物 标准管