第十一章 粗糙脉孢菌顺序四分子分析.ppt

粗糙脉孢菌顺序四分子分析 实验目的 了解粗糙脉孢菌的生活周期及特性 学习顺序四分子的遗传学分析方法 计算基因与着丝点之间的距离 粗糙脉孢菌 粗糙脉孢霉(Neurospora.crassa)属于球壳目（Sphaeriales）的一种真菌，菌丝多核，附有分生孢子。野生型可分离出营养缺陷型突变株，有性生殖形成梨形的子囊果，产生包含8个子囊孢子的子囊。子囊孢子为黑色，直线排列。主要在土壤中和禾本料植物上，尤其在玉米芯和棉籽壳上，是食用菌菌种最大的危害之一。 1927年B．O．Dodge 研究其生活史和孢子的形成 1932年C．C．Lindegren 把它用做遗传材料，用于分离交配型因子的研究 1941年G．W．Beadle和E．L．Tatum分离出突变株，开展以基因与酶假说为基础的研究。 后来分离出很多突变株，制作出与n=7的染色体数相对应的连锁图，被应用于突变机制、重组机制、基因的微细结构、互补性等的研究，为遗传学发展做了重要贡献。 粗糙脉孢菌作为遗传材料的优势 后代多，样本大，统计分析误差小 生活周期短 易培养，易筛选突变型 单倍体，不存在显隐问题 孢子按顺序排列在子囊中 粗糙脉孢菌的生活周期 第一次分裂分离子囊 + + + + - - - - 非重组型子囊：目的基因与着丝粒之间未发生重组 + + + + + + + + _ _ _ _ _ _ _ _ MI MII Mt 顺序四分子分析用于着丝粒作图 + + - - + + - - - - + + - - + + - + + + + - - + + - - - - + + 重组型子囊：目的基因与着丝粒之间发生重组 第二次分裂分离子囊 + _ + + + + + + + _ _ _ _ _ _ _ _ + + + - - - - + + 例子 基因与着丝点间距离的计算 其它分离子囊 基因转换：一个基因在联会过程中受到等位基因的影响而发生变化，基因转换总是伴随着染色体之间的交换。 实验材料 粗糙脉孢菌（Neurospora crassa） 野生型菌株，Lys+，接合型为A,分生孢子呈粉红色 缺陷型菌株， Lys-，接合型为a,分生孢子呈白色 实验步骤 1、杂交接种与培养： 野生型菌株（Lys+，A） ?缺陷型（Lys-，a） 2、压片观察子囊：（注意观察时期） 1）将附有子囊果的滤纸放入装有来苏尔溶液的培养皿中 2）取一张载玻片，滴1-2滴来苏尔，用接种针将子囊果挑出，放在载玻片上 3）盖上另一张载玻片，用手指压片，将子囊果压破 4）显微镜观察，统计各种类型子囊的数量，每人统计200个左右的子囊 一个子囊果中散出30-40个子囊  实验报告 品系 性状 思考 假设在基因与着丝点之间发生了双交换，你的数据和计算结果会发生怎样的偏差？ 在计算重组值的公式中，1/2的含义是什么？