临床分子医学中心特色技术（SpecificClinicalTests）教材.doc

临床分子医学中心特色技术Specific Clinical Tests） 借助染色体分析、基因芯片、FISH技术分别对染色体、基因组拷贝数变异、单分子进行不同水平、不同层次的检测，为血液、肿瘤、遗传性疾病的诊治提供实验室依据。 细胞学与细胞生物学技术平台 血液病染色体检查Hematological disease chromosome tests） 血液病染色体分析是造血组织和淋巴组织肿瘤临床检测的遗传学检测方法，为WHO在恶性血液病推荐的MICM分型的基本内容之一，对恶性血液病的诊断、治疗方案选择，疗效评估和预后预测方面具有重要价值，同时可作为监测白血病缓解、复发的重要参考指标。 ISCN: 46, XX, del(4) (p16) (p16) ISCN: 46, XY, t(1;9;22) (p36.3;q34;q11.2),t(8;15) (q22;q15) 流式细胞术（Flow CytoMeter，FCM） 依据细胞标记物的不同，鉴别出各种细胞群体，具有速度快、精度高、准确性好等优点。流式细胞术主要用于各种白血病和淋巴增殖性疾病（LPD）的免疫分型，如AML、ALL、CLL/SLL、CML、HL和NHL等的诊断分型，为临床开展个体化医疗提供依据。 FISH检测（FISH tests） 用于检测细胞内靶DNA或RNA分子在细胞或细胞器的形态、分布和定位。中心现已开展白血病、实体瘤、遗传性疾病相关FISH检测，协助临床诊断。 结核病诊断（Mycobacterium tuberculosis tests） 利用分子生物学及免疫学方法检测结核分枝杆菌（TB）： T-SPOT.TB tests：也称结核感染T细胞斑点试验，是欧美等国结核诊疗指南BCG接种人群结核筛查的首选试验。该方法具有较高的敏感性和特异性，对临床诊断或排除结核病具有重要的参考价值。 TB荧光定量PCR（PCR tests）：具有简便、快速，特异性高的特点。 分子生物学技术平台 采用Real-time PCR开展各类病原体检测；采用AS-PCR,甲基化PCR，多重PCR，MLPA ，一代测序等方法协助诊断单基因遗传病； 利用AffymetrixCNV）；利用二代测序检测全外显子突变或基于不同疾病的靶向测序。 全基因组基因芯片（Gene microarray） 采用Affymetrix公司可用于临床诊断的Cytoscan 系列高分辨HD基因芯片，分辨率大于400kbp，检测率达99%以上，尤其适合因染色体非平衡易位导致的拷贝数变异引起的不明原因智力落后、发育迟缓、发育缺陷和孤独症等各类遗传疾病诊断。 单基因遗传病诊断项目（Conventional techniques） 血液系统：地中海贫血，G6PD 神经系统：PWS/AS综合征，进行性肌营养不良，线粒体基因突变检测，脊肌萎缩症基因检测等； 免疫系统：原发性免疫缺陷综合症，XSCID疾病γc基因检测，XHIM综合征CD40L基因检测等； 代谢性疾病：21-PKU基因检测，HLD疾病ATP7B基因检测等； 其它：耳聋基因检测，性别基因检测，FGFR3基因检测等； 血液系统疾病基因诊断（Gene analysis for?hematological diseases）1．地中海贫血基因检测（Thalassemia gene analysis）地中海贫血（简称地贫）是我国南方最常见、危害大的遗传病，人群发生率约为7-10%，主要分α和β两种，以α地贫较常见，男女发病机率均等。α地贫基因常见以突变型和缺失型为主，β地贫基因以17种突变型为主。 2．G6PD缺乏症基因检测（G6PD deficiency gene?tests）遗传性葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是最常见的一种X连锁不完全显性遗传的酶缺乏病，由于G6PD基因突变，导致该酶活性降低，红细胞不能抵抗氧化损伤而遭受破坏，引起血红蛋白尿、黄疸、贫血等急性溶血反应。最常见的G6PD基因突变有位点G1376T，G1388A，A95G三种。目前检测方法为AS－PCR技术。 3．白血病融合基因检测（Leukemia fusion gene tests）白血病融合基因的改变已广泛用于白血病的准确分型与诊断、治疗方案选择、预后评估、残留白血病监测等，如BCR-ABL常见于慢性粒细胞白血病（CML）和部分急性髓性白血病（AML）及急性淋巴细胞白血病（ALL）；PML-RARa常见于急性早幼粒细胞白血病（APL-M3型）；ETO-AML1常见于AML-M2型中；近来研发MLL-AF4、E2A-PBX1、TEL-AML1等42种白血病融合基因检测，对判断白血病的危险因素与预后具有积极作用。 神经系统疾病