基于花生四烯酸代谢通路研究水飞蓟素对脂多糖诱导炎症模型.PDF

２０１７年６月 Ｖｏｌ．３５ Ｎｏ．６ Ｊｕｎｅ ２０１７ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ５７８～５８６ 研究论文 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１７．０１０２６ 基于花生四烯酸代谢通路研究水飞蓟素对 脂多糖诱导炎症模型影响 ∗ ∗ 麦旦提，　 杨　 婵，　 薛　 芸，　 王　 彦 ，　 阎　 超 （上海交通大学药学院，上海 ２００２１０） 摘要：以脂多糖类似物（ＫＬＡ）诱导的ＲＡＷ２６４７细胞为研究对象，采用代谢组学研究手段，研究水飞蓟素对脂多糖 诱导炎症模型中花生四烯酸代谢通路的影响。 以超高效液相色谱⁃三重四极杆质谱联用为平台，对不同浓度水飞 蓟素作用下ＫＬＡ诱导ＲＡＷ２６４７炎症细胞分泌的类二十烷酸代谢物进行定量分析，通过考察主成分分析（ＰＣＡ）、 正交偏最小二乘法判别分析（ＯＰＬＳ⁃ＤＡ）的ＶＩＰ值和Ｋｒｕｓｋａｌ⁃Ｗａｌｌｉｓ秩和检验结果显著性差异（Ｐ）值筛选代谢标记 物。 建立了５９种类二十烷酸（含１５种同位素内标）在５ｍｉｎ 内实现快速分离的液相色谱⁃质谱联用方法；确定了细 胞存活率在５８％～８０％ 的水飞蓟素浓度为５０～１５０ μｍｏｌ／ Ｌ；筛选出数据处理结果同时满足变异权重参数（ＶＩＰ）值＞ １且结果Ｐ值＜００５ 的类二十烷酸代谢标记物１２⁃ＯｘｏＬｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ Ｂ （１２⁃ＯｘｏＬＴＢ ）；通过分析柱状图和炎症信号 ４ ４ 通路，确定水飞蓟素借助其抗氧自由基特性发挥抗炎作用，通过抑制脂氧合酶⁃５ （５⁃ＬＯＸ）的活性及阻断５⁃ＬＯＸ代 谢通路中产生氧自由基的脂质过氧化反应来减少氧自由基及过氧化物的形成。 综上所述，所建立的方法能快速准 确地定量分析多种类二十烷酸，并从代谢组学角度解释了水飞蓟素的抗炎机制。 关键词：超高效液相色谱⁃串联质谱；类二十烷酸；同位素内标；水飞蓟素；代谢组学；炎症 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１７）０６⁃０５７８⁃０９ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｎ ｓｉｌｙｍａｒｉｎ ｉｍｐａｃｔ ｏｎ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｂａｓｅｄ ｏｎ ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｐａｔｈｗａｙ ∗ ∗ ＭＡＩ Ｄａｎｔｉ，ＹＡＮＧ Ｃｈａｎ，ＸＵＥ Ｙｕｎ，ＷＡＮＧＹａｎ ，ＹＡＮ Ｃｈａｏ （Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏ Ｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００２１０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ｏｆ ｔｈｉｓ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｓｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｉｌｙｍａｒｉｎ ｏｎ ｖｉｔｒｏ ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｍ