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* * * * 犬三种主要病毒分离鉴定与分型 1303 王娅 大学生科创兽医学院中期考核之 主 题 犬瘟热病毒 王娅 1303 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 犬细小病毒 CPV 分离 CDV 鉴定 犬传染性肝炎病毒 CAV 分型 王娅 1303 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 犬细小病毒 -------危害犬类最主要烈性传染病之一 一 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 1 犬细小病毒 血凝和血凝抑制 克隆入质粒载体 对比和分离毒株 采 集 分 离 鉴定分型 病犬粪便 PBS浸泡 离心冷藏 传代培养 犬细小病毒 CPV 实验操作详情 犬细小病毒CPV分离鉴定与分型操作 质粒载体 1%猪血红细胞 22以上HA效价 Pbs 0.5h -20℃ 猫肾F81 2%犊牛血清培养 ++++ 特定氨基酸分离 设计引物 琼脂糖 凝胶电泳 鉴定 采集与分离 分型 王娅 1303 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 犬瘟热病毒 -------危害犬类最主要烈性传染病之一 二 方法简介 2 犬瘟热病毒 间接荧光试验 RT-PCR检测 克隆入质粒载体 采 集 分 离 鉴定分型 血清全血腹水 过滤除菌 接种MDCK 观察细胞病变 犬瘟热病毒 CDV 实验操作详情 犬瘟热病毒CDV分离鉴定与分型操作 RNA试剂盒 合成cDNA 标准阳性血清 -20℃冻融三次 超声波350mA 5min 3000转 离心 10min DMCK 细胞 克隆入质粒载体 商业公司负责测序 间接免疫荧光 鉴定 采集与分离 分型 王娅 1303 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 犬传染性肝炎病毒 -------危害犬类最主要烈性传染病之一 三 方法简介 3 犬传染性肝炎病毒 间接荧光试验 PCR检测 克隆入质粒载体 采 集 分 离 鉴定分型 血清全血扁桃体 冻融除菌 接种MDCK 犊牛血清培养 犬传染性病毒 CAV 实验操作详情 犬传染性病毒CAV分离鉴定与分型操作 克隆入质粒载体 商业公司负责测序 间接免疫荧光 -20℃冻融三次 超声波350mA 5min 3000转 离心 10min DMCK 细胞 标准株对比 CR诊断 CAV E3基因序列 鉴定 采集与分离 分型 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 试验进度 -----试验现状分析 四 王娅 1303 试验进程 从临床到实验室的团队 临床采样 实验处理 技术保存 扬大动物医院 兽医大楼三楼 导师:孙怀昌 张信军 指导: 张 敏 徐光宇 学生: 王 娅 曹舒扬 1 进度表 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 2 设计方案 材料准备 亲手采样 6-9月 CPV( 15) CDV (13) CAV (9) 实验室分离 病毒培养 10月 3 未来计划 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 12月 CPV(5株) CDV(5株) CAV (5株) 培养鉴定 多数 商业公司测序 少数 保存备用 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 展望2015年 ----来年计划概述 五 王娅 1303 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 展望来年 2月材料汇总 3月发表论文 4月结题 1 犬三种主要病毒的分离鉴定与分型 谢谢 THE END 王娅 1303 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *

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