如何通过实验室技术鉴定临床有意义—培训课件.ppt

南宁输血医学研究 微柱凝胶技术 南宁输血医学研究 实验方法的比较 58 个AABB免疫血液学参比实验室常用的主要的方法中，49个实验室用试管法，7个用凝胶法，2个用固相法。 对于参比实验室，试管凝集法是检测临床有意义的抗体首选的方法。 利用多种实验技术，相互补充。 （Haywood.et al. 2011.Determination of optimal method for antibody identificaton in a reference laboratory） 南宁输血医学研究 结果的解释 阴性排除法,通过查看无反应的红细胞的抗原谱，可排除一些特异性抗体，同时可以估计有可能存在的抗体,以防有临床意义的抗体漏检，因为一个阳性反应格局可能是两种或多种抗体共同存在的格局。 南宁输血医学研究 抗原鉴定 病人血清中检测出一种抗体或多种抗体，红细胞上应该不携带相应的抗原。如病人血清中含有抗-M，红细胞上应不带有M抗原。 用血型结果，可排除一些抗体,并核对抗体鉴定的结果。 南宁输血医学研究 流程 抗体筛查 抗体筛查 抗体鉴定 抗原 鉴定 抗体 特异性 阳性 阴性排除 明确 临床 意义 有 相应抗原阴性的血液 判断 南宁输血医学研究 案例1 病人血型：CCDEe 献血者血型ccDEE,或ccDEe 南宁输血医学研究 抗体筛查的假阴性 假阴性：交叉配血不合或发生溶血性输血反应，抗体筛查的结果为阴性。 南宁输血医学研究 假阴性原因 1，人员操作过程、记录错误、标本错误； 2 ，低频抗原，红细胞不含有某些抗原； 3，陈旧，抗原性减弱； 4，弱抗体，如抗-Jka， (Jka+Jkb-)细胞w+，(Jka+Jkb+)细胞，无反应； 5，补体抗体，需要新鲜的血清； 6，实验方法的灵感度不够高。 南宁输血医学研究 复杂的反应格局（1） 1,所有的细胞都凝集，强弱一致 原因: 自身免疫性抗体； 针对高频抗原的抗体或抗-HI； 实验方法的特异性低（如）LISS、PEG、酶的非特异性抗体。 南宁输血医学研究 解决方法（1） 1,所有的细胞都凝集，强弱一致 方法: 自身对照； 自身和DAT阴性，可能是高频抗原的抗体，如抗-HI，常见于非O型的病人，排除方法：血浆与病人血型相同的细胞不反应或弱反应（A型、B型反定型细胞）； 非LISS、 PEG、酶的IAT实验方法。 南宁输血医学研究 复杂的反应格局（2） 2,反应格局不符合任何一个单一抗体的格局，凝集强弱不一 原因 1，2种或以上的混合抗体； 2，抗原强弱不一，纯合子和杂合子； 3， 细胞过于陈旧，抗原减弱； 4， 实验方法的灵敏度不高。 南宁输血医学研究 解决方法（2） 2,反应格局不符合任何一个单一抗体的格局，强弱不一样 方法 1，选择某一抗体的抗原阴性，其他抗体的抗 原阳性的谱细胞来排除其他抗体； 2，多个血型系统的抗原鉴定,排除一些抗体； 3，多套谱细胞； 南宁输血医学研究 解决方法（2） 2,反应格局不符合任何一个单一抗体的格局，强弱不一样 方法 4，选择新鲜的谱细胞 5，利用抗体的血清学特征（如酶，pH值，温度，剂量效应）； 6，利用多种实验技术和方法（吸收放散分离抗体等）。 南宁输血医学研究 谢 谢 * 南宁输血医学研究 硕士研究生毕业论文答辩 Confidential – For Internal Use Only ? NCCN All rights reserved. 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 如何通过实验室技术 鉴定临床有意义的血型抗体， 确保安全输血 莫秋红 南宁输血医学研究所　　 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 南宁输血医学研究 临床有意义的抗体 临床有意义的抗体：使红细胞寿命缩短，短时间内大量红细胞破坏，引起病人发生不良反应，如溶血性输血反应、新生儿溶血病。 在37℃中和间接抗球蛋白试验（IAT）中有反应。 南宁输血医学研究 临床有意义的抗体 自身抗体—温自身抗体型、冷自身抗体型 同种抗体—ABO、Rh等抗体 南宁输血医学研究 临床有意义的血型抗体 英国血液学标准委员会British Committee for Stan